Células HROG33 T0 M1

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 300878

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	HROG33 T0 M1 é uma linhagem celular primária de glioblastoma multiforme (GBM) humano, estabelecida a partir de tecido tumoral recém-ressecado de uma paciente adulta com glioblastoma de grau IV da OMS, localizado na região occipitotemporal esquerda. A designação “T0” refere-se ao tumor primário no diagnóstico inicial, e “M1” denota o modelo in vitro correspondente derivado dessa amostra. A linhagem celular foi gerada como parte de um esforço sistemático para estabelecer culturas de GBM com número ultrabaixo de passagens a partir de material tumoral tanto fresco quanto criopreservado de forma vital, com o objetivo de preservar características moleculares e funcionais específicas do paciente. A HROG33 T0 M1 apresenta crescimento aderente com morfologia semelhante à de fibroblastos, típica de culturas primárias de GBM. As células formam uma monocamada e exibem capacidade proliferativa consistente in vitro. No estudo comparativo de estabelecimento, culturas emparelhadas derivadas de tecido tumoral fresco e criopreservado não apresentaram diferenças significativas na morfologia, cinética de crescimento ou resposta a medicamentos. A caracterização imunofenotípica de linhagens celulares HROG representativas demonstrou a expressão de marcadores associados à linhagem neural, incluindo a proteína ácida fibrilar glial (GFAP), nestina e vimentina, consistente com um fenótipo derivado de glioma. As análises moleculares realizadas na série HROG incluíram a avaliação da metilação do promotor de MGMT, a amplificação de EGFR e o status mutacional de TP53, IDH1/2, KRAS e BRAF, corroborando a retenção de características genômicas específicas do tumor nas culturas estabelecidas. Do ponto de vista funcional, as linhagens celulares derivadas de HROG foram avaliadas quanto à sensibilidade a agentes de tratamento padrão e experimentais utilizados na terapia do GBM, incluindo temozolomida, BCNU (carmustina), vincristina e imatinibe. Os perfis de resposta aos medicamentos de pares de linhagens celulares correspondentes indicaram um comportamento farmacológico estável e reproduzível após a criopreservação do tecido. Como um modelo de GBM primário de passagem ultrabaixa, o HROG33 T0 M1 oferece um sistema in vitro clinicamente relevante para investigar a biologia do glioblastoma, a previsão da resposta terapêutica e a heterogeneidade tumoral específica do paciente, ao mesmo tempo em que minimiza artefatos associados à adaptação contínua de longo prazo das linhagens celulares.
Organismo	Humano
Tecido	Cérebro
Doença	Glioblastoma

Idade	46 anos
Gênero	Mulher
Etnia	caucasiano
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	HROG33 T0 M1 (número de catálogo da Cytion 300878)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_4U48

Meio de cultura	DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Suplementos	Adicione 10% de FBS ao meio
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Células HROG33 T0 M1

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular