Células HROC348Met

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 300871

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	HROC348Met é uma linhagem celular de carcinoma colorretal humano estabelecida a partir de uma metástase hepática metacrônica de um adenocarcinoma colorretal ressecado de um paciente adulto, pertencente à coleção modelo HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). A plataforma HROC foi desenvolvida por meio de um fluxo de trabalho padronizado de biobanco e modelagem tumoral, integrando anotação clínica, caracterização molecular, xenoenxertos derivados de pacientes (PDX) e as correspondentes culturas in vitro. A HROC348Met representa um dos modelos metastáticos derivados de tecido de câncer colorretal ressecado cirurgicamente e foi estabelecida em condições de baixa passagem para preservar as características biológicas específicas do tumor. Dentro da coleção HROC, as amostras metastáticas — particularmente as metástases hepáticas — demonstraram alta eficiência de enxerto em camundongos imunodeficientes, com uma taxa geral de aceitação de PDX de aproximadamente 68% em toda a coorte, e sucesso ainda maior para tumores metastáticos em comparação com os primários. Análises multivariadas identificaram o envolvimento linfonodal e mutações ativadoras nos genes KRAS e BRAF como preditores independentes do sucesso no estabelecimento do modelo. A coleção abrange todos os principais subtipos moleculares do carcinoma colorretal, incluindo instabilidade cromossômica (CIN), fenótipo de metilação de ilhas CpG (CIMP), tumores com microssatélites estáveis (MSS) e tumores com alta instabilidade de microssatélites (MSI-H), garantindo a representatividade molecular da doença em estágio avançado. O HROC348Met foi estabelecido dentro dessa estrutura rigorosamente caracterizada, com anotações clínico-patológicas e moleculares de acordo com protocolos padronizados. Por ser um modelo de carcinoma colorretal derivado de metástase e de baixa passagem, o HROC348Met é adequado para investigações sobre a biologia de tumores metastáticos, correlações genótipo-fenótipo e testes de resposta terapêutica, tanto em cultura 2D quanto em ambientes PDX in vivo. A abordagem integrada de biobanco subjacente à sua geração garante a disponibilidade de dados clínicos correspondentes e, quando aplicável, do material de xenoenxerto correspondente, possibilitando estudos translacionais em oncologia de precisão e na previsão da resposta a medicamentos.
Organismo	Humano
Tecido	Metástase hepática
Doença	Adenocarcinoma
Local da metástase	Fígado

Idade	77 anos
Gênero	Masculino
Etnia	caucasiano
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	HROC348Met (número de catálogo da Cytion 300871)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_1U99

Status da MSI	MSS

Meio de cultura	DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Suplementos	Adicione 10% de FBS ao meio
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos	A cada 3 a 5 dias
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Células HROC348Met

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular