Células HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 301568

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	A linhagem celular HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP é um modelo derivado de células humanas, desenvolvido para aplicações avançadas de edição genética e fluorescência. Essa linha celular é baseada em uma linha celular humana parental e foi modificada utilizando a tecnologia CRISPR-Cas9 para expressar o gene CAP-H (Proteína H Associada ao Cromossomo) marcado com a Proteína Fluorescente Verde Aprimorada monomérica (mEGFP). Essa modificação permite a visualização e o rastreamento precisos da CAP-H, um componente do complexo condensina, crucial para a condensação e estabilização cromossômica durante a divisão celular. A marcação com mEGFP fornece um sinal de fluorescência forte e estável, tornando essa linha celular ideal para imagens de células vivas e ensaios baseados em fluorescência. A linhagem celular HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP é particularmente valiosa para estudos sobre regulação do ciclo celular, mitose e dinâmica cromossômica. Os pesquisadores podem utilizar esse modelo para investigar os papéis dos complexos de condensina na manutenção da integridade cromossômica, especialmente durante fases críticas, como a metáfase e a anáfase. A integração estável da etiqueta mEGFP garante expressão consistente e resultados experimentais confiáveis, aumentando a reprodutibilidade entre diferentes estudos.
Organismo	Humano
Tecido	Endocérvix
Doença	Adenocarcinoma
Local da metástase	Localização do tumor primário (endocérvix)
Aplicações	Biologia do complexo condensina I; imagem de CAP-H; condensação cromossômica; arquitetura das cromátides mitóticas; imagem de células vivas; pesquisa do ciclo celular; validação de knock-in por CRISPR; estudos de integridade cromossômica
Sinônimos	HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP #86, HK CRISPR CAP-H-mEGFP

Idade	30 anos
Gênero	Mulher
Etnia	afro-americano
Morfologia	Células de tipo epitelial com formato de pedra em mosaico
Tipo de célula	Células epiteliais
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP (número de catálogo da Cytion 301568)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_UR43
Depositante	Laboratório Ellenberg (EMBL)
Situação em relação aos OGMs	GMO-S1: Esta linhagem HeLa Kyoto contém um knock-in de mEGFP mediado por CRISPR no locus CAP-H, permitindo a visualização em tempo real da cromatina mitótica. Essa classificação se aplica apenas na Alemanha e pode variar em outros países.

Produtos	EGFP (Proteína Fluorescente Verde Aprimorada)

Meio de cultura	DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Suplementos	Adicione 10% de FBS ao meio
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos	2 a 3 vezes por semana
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Células HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular