Células HEK293
US$ 395,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações essenciais sobre as células HEK293
| Descrição | A linhagem celular HEK293, uma linhagem epitelial imortalizada derivada de células renais embrionárias humanas na década de 1970 por Alex van der Eb na Universidade de Utrecht, tornou-se um modelo experimental fundamental na biologia molecular e em aplicações biotecnológicas devido à sua notável versatilidade e facilidade de manipulação genética. A transformação da linhagem celular HEK293 envolveu a integração de um segmento específico do DNA do adenovírus 5, incorporando os genes adenovirais E1A e E1B ao genoma celular. A modificação do DNA adenoviral conferiu à linhagem celular a capacidade de absorver DNA estranho de forma eficiente, uma característica conhecida como alta eficiência de transfecção. A integração do DNA viral no genoma das células HEK293 resultou na imortalização celular e aumentou significativamente a utilidade dessas células em aplicações biotecnológicas, facilitando a incorporação e a expressão estáveis de DNA exógeno, um processo denominado transfecção estável. Essa capacidade permite a presença e a função persistentes de genes estranhos dentro das células, tornando as células HEK293 uma ferramenta inestimável para estudos genéticos e biotecnologia. Como resultado, as células HEK293 tornaram-se um recurso fundamental na biotecnologia para a produção de proteínas recombinantes, incluindo proteínas terapêuticas vitais, e atuam como células-hospedeiras robustas para a geração de vetores virais, particularmente vetores adenovirais e lentivirais. As células HEK 293 são essenciais na indústria farmacêutica para ensaios de triagem de alto rendimento, a fabricação de terapias gênicas direcionadas a genes específicos relacionados a doenças monogênicas e estudos de infecção adenoviral. Na biotecnologia industrial, a utilidade da linhagem celular humana HEK293 se estende à produção de enzimas recombinantes, à produção de vetores virais, como os vetores adenovirais, à produção de proteínas e ao desenvolvimento de biossensores. A pesquisa toxicológica se beneficia da aplicação da linhagem celular HEK na avaliação dos impactos de substâncias químicas na biologia celular, incluindo os efeitos em células renais típicas e o potencial para terapias gênicas. A capacidade da linhagem celular imortal HEK293 de produzir proteínas nativas de forma eficiente destaca seu papel essencial na pesquisa médica, incluindo a pesquisa sobre o câncer e a exploração dos fundamentos da terapia gênica. As células HEK293 oferecem uma plataforma única para o estudo da biologia celular e de proteínas de interesse, superando outras linhas celulares em versatilidade e utilidade, tanto em aplicações de pesquisa quanto em aplicações industriais. Em comparação, as células HEK293T, uma variante da HEK293, são modificadas para aumentar a eficiência de transfecção; as células HEK293F são adaptadas para cultura em suspensão a fim de facilitar a produção de proteínas em larga escala; e outras linhagens celulares de mamíferos, como as células Vero, derivadas de tecido renal de macaco, são utilizadas principalmente no desenvolvimento de vacinas e em estudos virais. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tecido | Rim |
| Aplicações | Hospedeiro de transfecção |
| Sinônimos | Hek293, HEK-293, HEK/293, HEK 293, HEK,293, 293, 293 HEK, 293 Ad5, Rim embrionário humano 293 |
Especificações sobre as células HEK 293
| Idade | Feto |
|---|---|
| Gênero | Mulher |
| Morfologia | De tipo epitelial |
| Propriedades de crescimento | Monocamada, aderente |
Documentação
| Referência | HEK293 (número de catálogo da Cytion 300192) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_0045 |
| Situação em relação aos OGMs | GMO-S1: Esta linhagem celular HEK293, derivada de rim embrionário, contém sequências E1A/E1B do adenovírus 5 devido à transformação, mas não libera vírus infecciosos, o que permite uma alta capacidade proliferativa. A modificação está presente de forma estável nas células do rim embrionário. Esta classificação se aplica apenas na Alemanha e pode diferir em outros países. |
Genômica das células HEK-293
| Receptores expressos | Vitronectina |
|---|---|
| Expressão de proteínas | CEA negativo, p53 positivo |
| Tumorigênico | Em camundongos nude |
| Suscetibilidade ao vírus | Transformado com DNA do adenovírus 5 DNA do adenovírus 5 |
| Status de ploidia | 30% das células HEK293 apresentam cariótipos hipotriploides com 64 cromossomos modais. Ploidias mais elevadas foram observadas em 4,2% das células. |
Diretrizes para o cultivo da linha celular humana 293
| Meio de cultura | EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Tempo de duplicação | 30 horas |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Densidade de semeadura | 1 x 10⁴ células/cm² formarão uma camada confluente em cerca de 4 dias. |
| Renovação de fluidos | 2 vezes por semana |
| Recuperação pós-degelo | Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas. |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
|
| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Garantia de qualidade
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
|---|
Certificado de Análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 300192-021123 | Certificado de Análise | 23. May. 2025 | 300192 |
| 300192-060922 | Certificado de Análise | 23. May. 2025 | 300192 |
| 300192-251124 | Certificado de Análise | 23. May. 2025 | 300192 |
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