Células HEK293-Rpn11-HTBH

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 305719

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Certificado de Análise (CoA)

Descrição	As células HEK293 estáveis-Rpn11-HTBH são um derivado transfectado de forma estável da linhagem celular HEK293 (Rim Embrionário Humano 293), projetadas para expressar uma versão marcada da Rpn11 (também conhecida como PSMD14 ou POH1), a subunidade deubiquitinase do complexo da tampa do proteassoma 26S. A Rpn11 é uma desubiquitinase dependente de Zn²⁺ com domínio JAMM que remove cadeias de ubiquitina de substratos ligados ao proteassoma durante a degradação proteassômica. A marcação HTBH (hexahistidina-TEV-peptídeo aceitador de biotina-hexahistidina) permite a purificação por afinidade de complexos contendo Rpn11 em condições nativas, tornando essa linhagem particularmente adequada para a purificação de complexos do proteassoma e estudos de interatoma. Essa linhagem celular é aplicável em estudos da biologia do proteassoma 26S, da regulação da via ubiquitina-proteassoma (UPS), da função de Rpn11/PSMD14 no controle de qualidade das proteínas, da montagem e dinâmica do proteassoma e do mecanismo de ação dos inibidores do proteassoma. Ela também é utilizada para a purificação por afinidade de complexos proteassômicos nativos e como modelo para o estudo da biologia das desubiquitinases no contexto do proteassoma. O sistema de marcação HTBH permite a purificação altamente rigorosa de complexos biotinilados por meio de pulldowns baseados em estreptavidina. As células HEK293 estáveis-Rpn11-HTBH são mantidas em cultura aderente em DMEM suplementado com 10% de FBS e o antibiótico de seleção apropriado para manter a expressão do transgene a 37 °C em atmosfera umidificada com 5% de CO₂. As células são subcultivadas com Accutase quando atingem 80–90% de confluência (proporção de divisão de 1:5 a 1:10). O meio é renovado a cada 2–3 dias.
Organismo	Humano
Tecido	Rim
Doença	Rim fetal transformado/imortalizado (linha celular HEK293; transgene Rpn11-HTBH)
Aplicações	Biologia do proteassoma 26S; função do Rpn11/PSMD14; via ubiquitina-proteassoma; purificação de complexos proteassômicos; biologia das desubiquitinases; purificação por afinidade com a etiqueta HTBH; estudos do interatoma do proteassoma

Morfologia	De tipo epitelial
Tipo de célula	Células epiteliais
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	Células HEK293 estáveis - Rpn11-HTBH (número de catálogo da Cytion 305719)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
Situação em relação aos OGMs	GMO-S1: Este derivado de HEK293 contém uma cassete de expressão de Rpn11-HTBH integrada de forma estável (Rpn11/PSMD14 marcado com hexahistidina-TEV-peptídeo aceitador de biotina-hexahistidina). Essa classificação se aplica apenas na Alemanha e pode ser diferente em outros países.

Meio de cultura	DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Suplementos	Adicione 10% de FBS ao meio
Reagente de dissociação	A maioria das células se desprende no PBS; se necessário, adicione Accutase por 5 minutos à temperatura ambiente
Tempo de duplicação	aproximadamente 24 a 36 horas
Subcultura	Remova o meio, lave com PBS sem cálcio e magnésio, cubra com Accutase, incube por 8 a 10 minutos à temperatura ambiente, ressuspenda no meio, centrifugue a 300×g por 3 minutos, descarte o sobrenadante e replante em meio fresco.
Proporção de divisão	1 a 10
Densidade de semeadura	2 a 4 × 10⁴ células/cm^²
Renovação de fluidos	A cada 2 ou 3 dias
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando suavemente. Centrifugue a mistura a 200 x g por 5 minutos e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento. Siga o procedimento descrito na seção “Recuperação pós-descongelamento”
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Número do lote	Tipo de certificado	Data	Número de catálogo
305719-040526	Certificado de Análise	24. Jun. 2026	305719

Células HEK293-Rpn11-HTBH

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular

Certificado de Análise (CoA)