Células HCT116-GFP

A HCT116-GFP é um derivado geneticamente modificado da linhagem celular HCT116 de carcinoma colorretal humano, projetada para expressar constitutivamente a proteína fluorescente verde (GFP). A linhagem parental HCT116 tem origem em um carcinoma de cólon de um paciente adulto e é amplamente utilizada como modelo de câncer colorretal com deficiência de reparo de incompatibilidade (MMR-deficiente). Análises citogenéticas demonstraram que as células HCT116 apresentam, tipicamente, um cariótipo quase diploide com alterações cromossômicas definidas, incluindo rearranjos estruturais e variações no número de cópias características de tumores colorretais com instabilidade de microssatélites positiva. A introdução do gene repórter GFP permite a visualização em tempo real do comportamento celular sem alterar substancialmente as propriedades genéticas e fenotípicas intrínsecas da linhagem parental.

A marcação com GFP nas células HCT116-GFP é comumente obtida por meio de transfecção estável, resultando em fluorescência uniforme que facilita a imagem de células vivas, o rastreamento celular e a análise quantitativa da proliferação, migração e dinâmica de crescimento tumoral. Essa modificação é particularmente valiosa em ensaios in vitro e em modelos de xenoenxertos in vivo, nos quais a expressão de GFP permite o monitoramento não invasivo da progressão tumoral, da disseminação metastática e da resposta a intervenções terapêuticas. Abordagens de perfil fenotípico baseadas em fluorescência demonstraram que linhagens celulares de câncer de cólon, incluindo a HCT116, exibem assinaturas intracelulares distintas que podem ser capturadas por meio de metodologias baseadas em imagens, corroborando a utilidade de repórteres fluorescentes, como a GFP, para aplicações de triagem de alto conteúdo.

A HCT116-GFP serve como uma ferramenta robusta para investigar a biologia do câncer colorretal, permitindo a análise detalhada do comportamento das células tumorais, das interações com o microambiente e da eficácia terapêutica, tanto em contextos de pesquisa básica quanto translacional.

Modificação genética: Modificada de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, a fim de expressar o repórter de proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantida como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.