Células DI TNC1
US$ 550,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações gerais
| Descrição | A linhagem celular DI TNC1 é um modelo de astrócito imortalizado derivado de astrócitos primários do tipo 1, obtidos do diencéfalo de um rato recém-nascido. As células foram imortalizadas utilizando o antígeno T intermediário do poliomavírus, o que lhes conferiu a capacidade de proliferar indefinidamente, mantendo, ao mesmo tempo, várias características dos astrócitos primários. As células DI TNC1 são amplamente utilizadas em estudos de neuroinflamação e neuroproteção, particularmente para explorar o metabolismo energético dos astrócitos, a resposta ao estresse oxidativo e a regulação das vias inflamatórias. Essas células expressam marcadores astrocíticos essenciais, como a proteína ácida fibrilar glial (GFAP) e a proteína S100β, e estão envolvidas em processos metabólicos, incluindo o armazenamento de glicogênio e o fornecimento de energia aos neurônios. Uma das principais características dos astrócitos DI TNC1 é seu envolvimento em estudos de metabolismo energético. Pesquisas demonstraram que essas células respondem a vários neurotransmissores, como a noradrenalina e o peptídeo intestinal vasoativo (VIP), por meio da glicogenólise e da modulação dos níveis de AMP cíclico (cAMP). Além disso, demonstrou-se que as células DI TNC1 utilizam glicose e produzem lactato, o que é crucial para sustentar as funções neuronais. No entanto, certas respostas observadas em astrócitos primários, como a glicólise estimulada pelo glutamato ou a ressíntese significativa de glicogênio a longo prazo, não são tão robustas nas células DI TNC1. Isso destaca a utilidade das células DI TNC1 na análise de aspectos específicos da fisiologia dos astrócitos que são relevantes para a dinâmica energética no sistema nervoso central. Outra área significativa de estudo que utiliza células DI TNC1 envolve a investigação do estresse oxidativo e das vias de sinalização inflamatória. Por exemplo, as células DI TNC1 têm sido utilizadas para analisar a regulação das vias do fator nuclear kappa-cadeia leve-potenciador de células B ativadas (NF-κB) e do fator nuclear eritróide 2-relacionado 2 (Nrf2). Experimentos com polifenóis botânicos, como a quercetina, e extratos de plantas, como a ashwagandha, demonstraram que esses compostos podem modular as vias do NF-κB e do Nrf2/ARE (elemento de resposta antioxidante) nos astrócitos DI TNC1. Especificamente, verificou-se que a quercetina inibe a atividade do NF-κB induzida pelo lipopolissacarídeo (LPS) e potencializa as defesas antioxidantes mediadas pelo Nrf2, ilustrando o potencial dessas células para a triagem de agentes anti-inflamatórios e neuroprotetores. |
|---|---|
| Organismo | Rato |
| Tecido | Cérebro, diencéfalo |
| Doença | Normal |
| Sinônimos | DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1 |
Características
| Raça/Subespécie | Sprague Dawley |
|---|---|
| Idade | 1 dia |
| Gênero | Não especificado |
| Morfologia | Fibroblasto |
| Tipo de célula | Astrocieto do tipo II |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | DI TNC1 (número de catálogo da Cytion 305343) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 2 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_0247 |
| Situação em relação aos OGMs | GMO-S1: Esta linhagem celular de astrócitos de rato (DI TNC1) contém uma construção da região inicial do SV40 sob o controle do promotor GFAP, introduzida por meio de transfecção de plasmídeo, o que permite a imortalização. A inserção é estável em células derivadas de astrócitos primários. Esta classificação se aplica apenas na Alemanha e pode diferir em outros países. |
Dados biomoleculares
| Expressão de proteínas | Genes expressos: alfa-2-macroglobulina, transferrina |
|---|---|
| Tumorigênico | Não, foi testado em camundongos imunossuprimidos, mas formou colônias em meio semissólido |
| Vírus | Transformante: Vírus simiano 40 (SV40) |
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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Certificado de Análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305343-130924 | Certificado de Análise | 23. May. 2025 | 305343 |