Células DAKIKI

A DAKIKI é uma linhagem celular linfoblastoide B humana positiva para o vírus de Epstein-Barr (EBV) que expressa IgA1 de superfície e secreta IgA1 polimérica. Ela foi originalmente derivada de linfócitos periféricos de um paciente adulto com carcinoma nasofaríngeo e, posteriormente, estabelecida como uma cultura em suspensão de proliferação contínua. As células apresentam morfologia linfoblastoide típica e crescem em meios à base de RPMI suplementados com soro. A DAKIKI tem sido amplamente utilizada como modelo de células B produtoras de IgA1 humana, particularmente para estudos que investigam a síntese de imunoglobulinas, a regulação da secreção e a glicosilação pós-traducional.

Análises bioquímicas e baseadas em lectinas demonstraram que a IgA1 secretada pelas células DAKIKI apresenta glicanos O-ligados com deficiência de galactose na região da articulação. A análise da composição de monossacarídeos e o ELISA com lectinas confirmam o enriquecimento de resíduos terminais ou de N-acetilgalactosamina (GalNAc) α2,6-sialilada, uma glicoforma característica da IgA1 glicosilada de forma anômala observada na nefropatia por IgA. O tratamento com neuraminidase aumenta significativamente a reatividade da aglutinina Helix aspersa, indicando a presença de estruturas de GalNAc sialiladas. Ensaios funcionais utilizando frações enriquecidas em Golgi de células DAKIKI demonstram atividade da α2,6-sialiltransferase CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1, confirmando a capacidade dessas células de sialilar diretamente O-glicanos deficientes em Gal. Análises transcricionais revelam a expressão de ST6-GalNAcII, mas não de ST6-GalNAcI, corroborando o papel de ST6-GalNAcII na mediação da sialilação α2,6 do GalNAc da região de articulação na IgA1.

Além de sua utilidade na pesquisa de glicosilação, o DAKIKI foi avaliado quanto à sua responsividade a fatores indutores de células B e ésteres de forbol, que podem modular a secreção de imunoglobulinas em certas linhagens de células B humanas. Embora o DAKIKI secrete IgA de forma constitutiva, ele foi incluído entre os modelos de células B transformadas pelo EBV utilizados para estudar a regulação da produção de imunoglobulinas e os estados de diferenciação. Devido ao seu perfil estável de secreção de IgA1 e à produção reproduzível de glicanos da região de articulação, α2,6-sialilados e deficientes em galactose, o DAKIKI representa um sistema in vitro bem caracterizado para investigar os mecanismos de glicosilação da IgA1, diferenciação de células B e a patogênese molecular de doenças associadas à IgA.