Células CTX

A CTX (também designada CTX0E03) é uma linhagem de células-tronco neurais humanas condicionalmente imortalizadas, derivada do neuroepitélio cortical fetal humano do primeiro trimestre. A linhagem foi gerada por integração retroviral de um transgene de fusão c-mycER^TAM, que estimula a proliferação celular apenas na presença de 4-hidroxitamoxifeno (4-OHT). Na ausência de 4-OHT e em meio livre de mitógenos, as células CTX0E03 sofrem parada de crescimento e se diferenciam em neurônios e astrócitos, mantendo a capacidade de diferenciação multipotente. A linhagem é clonal, possui cariótipo humano normal (46,XY) e foi desenvolvida em condições compatíveis com as BPF (Boas Práticas de Fabricação) para possível aplicação clínica.

A CTX0E03 foi avaliada em modelos pré-clínicos de acidente vascular cerebral isquêmico (modelo de rato com oclusão da artéria cerebral média [MCAo]), nos quais as células implantadas promoveram uma recuperação significativa da função sensório-motora. A linhagem entrou em ensaios clínicos para o tratamento do AVC. Ela também é utilizada como modelo in vitro para a biologia de células-tronco neurais, diferenciação de neurônios corticais, pesquisa sobre a doença de Alzheimer (estudos de toxicidade do Abeta) e triagem neurofarmacológica. O sistema de imortalização condicional torna o CTX0E03 particularmente adequado para estudos de segurança e eficácia, já que a proliferação pode ser desativada pela remoção do 4-OHT antes do transplante.

O CTX0E03 é expandido em DMEM/F12 suplementado com suplemento N2, EGF (20 ng/ml) e FGF-2 (20 ng/ml), juntamente com 4-OHT (1 μM), em superfícies revestidas com laminina a 37 °C em 5% de CO₂. Para a diferenciação, os fatores de crescimento e o 4-OHT são retirados. A linhagem é classificada no nível de biossegurança 1 (GMO-S1 na Alemanha devido ao transgene c-mycERTAM integrado). Os usuários devem cumprir as regulamentações aplicáveis a OGMs em sua jurisdição.