Células CDNR4
US$ 800,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Informações gerais
| Descrição | A linhagem celular CDNR4 compreende um subconjunto especializado originário da linhagem celular COMMA-D, conhecida por servir de modelo para o carcinoma mamário em camundongos. Essa subpopulação clonal passou por uma caracterização extensiva, revelando uma série de propriedades e funcionalidades únicas. Uma das características mais marcantes das células CDNR4 é sua semelhança com as células-tronco mamárias, o que as posiciona como um recurso significativo para a exploração de aspectos da biologia das células-tronco, da carcinogênese e da heterogeneidade celular dentro das populações. Essas células foram desenvolvidas por meio da transfecção de um transposon portador de genes de resistência à canamicina e à neomicina (gene Tn5), o que levou ao surgimento de várias características e capacidades intrigantes, incluindo seu potencial de se diferenciarem tanto em fenótipos preneoplásicos quanto neoplásicos. Originadas da linhagem COMMA-D, que foi inicialmente estudada quanto à sua heterogeneidade celular por meio de diversas técnicas, como microscopia de contraste de fase, coloração imunocitoquímica, análise do conteúdo de DNA e avaliações do potencial oncogênico, as células CDNR4 se destacam como um clone distinto. Por meio de métodos específicos de transfecção e seleção, subpopulações clonais como a CDNR4 foram isoladas, cada uma mantendo um grau da heterogeneidade observada nas células parentais originais da COMMA-D. Essa retenção da heterogeneidade ressalta a natureza complexa dessas populações celulares e aumenta o valor das células CDNR4 em pesquisas focadas na diferenciação celular e na progressão do câncer. |
|---|---|
| Organismo | Mouse |
| Tecido | Mama |
| Doença | Adenocarcinoma |
Características
| Idade | 1 ano |
|---|---|
| Gênero | Mulher |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | CDNR4 (número de catálogo da Cytion 400391) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_5719 |
Dados biomoleculares
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Densidade de semeadura | Recomenda-se 2 x 10⁴ células/cm² |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Recuperação pós-degelo | Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas. |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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