Células B-LCL-HROG02

A B-LCL-HROG02 é uma linhagem celular linfoblastoide B transformada pelo vírus de Epstein-Barr (EBV) humano (B-LCL) estabelecida a partir do sangue periférico de um paciente caucasiano de 68 anos com câncer gástrico, pertencente à série do biobanco HROG, que corresponde à coleção de B-LCL de câncer gástrico da série HROC de câncer colorretal. A imortalização in vitro mediada pelo EBV de linfócitos B primários do sangue periférico gerou uma linhagem celular em suspensão que se prolifera de forma estável, com morfologia semelhante à de linfoblastos. As células HROG02 expressam constitutivamente antígenos de latência do EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) e altos níveis de moléculas HLA de classe I e II, moléculas coestimuladoras CD80 e CD86, moléculas de adesão CD54 e CD58, e marcadores de células B CD19, CD20 e CD23.

A B-LCL-HROG02 é utilizada em ensaios funcionais de células T e células NK, tipagem de HLA, reações de linfócitos mistos, estudos de apresentação de antígenos e protocolos de indução de CTL. Dentro do biobanco HROG, que conta com amostras correspondentes aos pacientes, ela fornece uma referência imunológica definida para a pesquisa do câncer gástrico, possibilitando estudos autólogos ou alogênicos das respostas imunes associadas ao tumor. A linhagem apoia investigações sobre a reatividade das células T específicas para o câncer gástrico e sistemas de ensaios imunológicos correspondentes aos pacientes, relevantes para a imunologia do tumor gástrico.

A B-LCL-HROG02 é cultivada em suspensão em RPMI 1640 suplementado com 15–20% de FBS a 37 °C em atmosfera umidificada com 5% de CO₂. As células são repicadas a cada 2–3 dias por diluição para 2–5 × 10⁵ células/ml. Não é necessária dissociação enzimática. Todo o trabalho com esta linhagem celular positiva para o EBV deve estar em conformidade com os requisitos de contenção de biossegurança BSL-2 e com as regulamentações institucionais e nacionais aplicáveis que regem o material biológico transformado pelo EBV.