Células B-LCL-HROC59

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 302073

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	A B-LCL-HROC59 é uma linhagem celular linfoblastoide B humana imortalizada pelo vírus de Epstein-Barr (EBV), gerada a partir de células B infiltrantes de tumor (TiBc) isoladas de um carcinoma colorretal primário denominado HROC59. O tumor de origem foi ressecado de um paciente adulto do sexo masculino com carcinoma colorretal esporádico do lado direito e doença em estágio avançado. O tecido tumoral fresco foi dissociado mecanicamente para obter suspensões de células únicas, e as células B foram imortalizadas seletivamente in vitro utilizando sobrenadante contendo EBV derivado da linhagem celular de sagui B95/8, na presença de ciclosporina A para suprimir a expansão das células T e NK. A cultura de longo prazo resultou no crescimento estável de uma população monoclonal de células B, conforme demonstrado pela análise do rearranjo de genes de imunoglobulina. A B-LCL-HROC59 secreta imunoglobulina G (IgG) como seu isotipo exclusivo, com produção estável ao longo de uma cultura prolongada. Em ensaios de ligação baseados em células, a IgG derivada da B-LCL-HROC59 demonstrou apenas ligação mínima às linhagens celulares de carcinoma colorretal alogênico testadas, em comparação com outras IgGs derivadas de TiBc que exibiram reatividade mais forte às células tumorais. Não foi observada evidência de crescimento espontâneo de células B na ausência de EBV exógeno durante o estabelecimento da cultura, indicando que a imortalização ocorreu in vitro, em vez de refletir uma transformação induzida por EBV latente in vivo. Como uma linhagem de células B monoclonais, expostas a antígenos e infiltrantes de tumor, a B-LCL-HROC59 fornece um modelo definido para o estudo das respostas imunes humorais no microambiente do câncer colorretal e para a investigação da especificidade e das propriedades funcionais dos anticorpos associados ao tumor.
Organismo	Humano
Tecido	Sangue periférico
Doença	Carcinoma
Sinônimos	Bc HROC59, TiBcHROC59

Idade	76 anos
Gênero	Masculino
Etnia	caucasiano
Morfologia	Células redondas
Tipo de célula	Linfoblasto B
Propriedades de crescimento	Suspensão

Referência	B-LCL-HROC59 (número de catálogo da Cytion 302073)
Nível de biossegurança	2
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_A7US

Antígenos de superfície	CD19
Vírus	Transformante: EBV

Meio de cultura	RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Suplementos	Adicione ao meio 10% de FBS inativado por calor
Subcultura	Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, colete uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 1 x 10^⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Células B-LCL-HROC59

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular