Células B-LCL-HROC57

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 302072

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Descrição	A B-LCL-HROC57 é uma linhagem celular linfoblastoide B humana imortalizada pelo vírus de Epstein-Barr (EBV), estabelecida a partir de células B infiltrantes de tumor (TiBc) isoladas de um carcinoma colorretal primário denominado HROC57. O tumor parental teve origem em um paciente adulto do sexo masculino com carcinoma colorretal do lado direito, apresentando diferenciação neuroendócrina e doença em estágio avançado. O tecido tumoral fresco foi dissociado mecanicamente para obter suspensões de células únicas, e as células B foram imortalizadas seletivamente in vitro utilizando sobrenadante contendo EBV derivado da linhagem celular de sagui B95/8, na presença de ciclosporina A para inibir a proliferação de células T e NK. A expansão de longo prazo resultou em uma cultura estável de células B monoclonais, conforme confirmado pela análise do rearranjo do gene da imunoglobulina. A B-LCL-HROC57 secreta imunoglobulina G (IgG) como seu isotipo exclusivo, com produção estável ao longo de uma cultura prolongada. Em ensaios de ligação baseados em células, a IgG derivada da B-LCL-HROC57 demonstra ligação mensurável a linhagens celulares de carcinoma colorretal alogênico, com intensidade de ligação intermediária em relação a outras IgGs derivadas de TiBc. Análises de imunofluorescência indicam reconhecimento predominantemente intracelular do alvo nas células tumorais. Não ocorre proliferação espontânea de células B na ausência de EBV exógeno durante o estabelecimento da cultura, o que exclui a transformação induzida por EBV latente in vivo. Como uma linhagem de células B monoclonais, expostas a antígenos e infiltrantes de tumor, a B-LCL-HROC57 representa um modelo definido para investigar respostas imunes humorais no carcinoma colorretal e para identificar antígenos associados ao tumor reconhecidos por clones de células B expandidos localmente.
Organismo	Humano
Tecido	Sangue periférico
Doença	Carcinoma
Sinônimos	Bc HROC57, TiBcHROC57

Idade	43 anos
Gênero	Masculino
Etnia	caucasiano
Morfologia	Células redondas
Tipo de célula	Linfoblasto B
Propriedades de crescimento	Suspensão

Referência	B-LCL-HROC57 (número de catálogo da Cytion 302072)
Nível de biossegurança	2
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_A7UR

Antígenos de superfície	CD19
Vírus	Transformante: EBV

Meio de cultura	RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Suplementos	Adicione ao meio 10% de FBS inativado por calor
Subcultura	Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, colete uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 1 x 10^⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Células B-LCL-HROC57

Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular