Células AMO-1
Informações gerais
| Descrição | A linhagem celular AMO-1 é um modelo de mieloma múltiplo derivado de uma neoplasia maligna de células plasmáticas. Ela é amplamente utilizada em pesquisas que exploram os mecanismos de sensibilidade a medicamentos, apoptose e sinalização das células tumorais no mieloma. As células AMO-1 são sensíveis a vários agentes quimioterápicos e tratamentos direcionados, como inibidores do proteassoma e inibidores da tirosina quinase, que se tornaram essenciais na terapia do mieloma múltiplo. Estudos demonstraram que o tratamento com inibidores da tirosina quinase do baço (Syk) induz efeitos antiproliferativos e pró-apoptóticos significativos nas células AMO-1. Essa ação ocorre por meio da inibição de vias de sinalização críticas, incluindo MAPK e NF-kappaB, e é caracterizada pelo aumento da liberação de citocromo c e pela ativação de marcadores apoptóticos, como a caspase-3 e a PARP-1. Além disso, a inibição da Syk reduz a migração celular e a interação com componentes estromais da medula óssea, limitando ainda mais a sobrevivência das células do mieloma. As células AMO-1 também demonstraram suscetibilidade a compostos naturais que atuam no eixo Notch3-p53, como os derivados da sofocarpina. Esses compostos reduzem a viabilidade celular por meio da regulação negativa de proteínas antiapoptóticas (por exemplo, Bcl-2) e da regulação positiva de fatores pró-apoptóticos (por exemplo, Bax e caspase-3 clivada). Além disso, o tratamento com sofocarpina diminui a expressão de Notch3, uma via associada à progressão tumoral no mieloma e em outros tipos de câncer. Isso torna as células AMO-1 um modelo eficaz para o teste de medicamentos destinados a modificar a sinalização de Notch e as vias apoptóticas mediadas por p53. No contexto da imunoterapia, as células AMO-1 são reconhecidas pelas células T γδ por meio da expressão da molécula de adesão intercelular 1 (ICAM-1), e a transfecção para aumentar a expressão de ICAM-1 aumenta sua suscetibilidade à lise mediada por células T. Essa característica apoia estudos sobre imunoterapias direcionadas ao mieloma como uma abordagem alternativa para casos resistentes ao tratamento. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tecido | Ascite |
| Doença | Mieloma múltiplo |
| Sinônimos | AMo1, AMO1 |
Características
| Idade | 64 anos |
|---|---|
| Gênero | Mulher |
| Etnia | Japonês |
| Morfologia | Células redondas |
| Propriedades de crescimento | Suspensão |
Dados regulatórios
| Referência | AMO-1 (número de catálogo da Cytion 305525) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_1806 |
Dados biomoleculares
| Perfil mutacional | Fusão gênica: IGKV1-8-IGKJ1; Fusão gênica: IGKV3-20-IGKJ2; Mutação: BCOR, p.Gln312del (c.932_934AGC[1]) (c.935_937delAGC), heterozigótica; Mutação: KRAS, p.Ala146Thr (c.436G>A), heterozigótica; Mutação: STAT3, p.Cys712Tyr (c.2135G>A), heterozigótica; Mutação: TET2, p.Gln1699Ter (c.5095C>T), heterozigótica |
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Manuseio
| Meio de cultura | RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a) |
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| Suplementos | Adicione 20% de FBS ao meio |
| Subcultura | Recolha as células em suspensão em um tubo de 15 ml e lave delicadamente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (use 3 a 5 ml para frascos T25 e 5 a 10 ml para frascos T75). Aplique Accutase (1 a 2 ml para frascos T25, 2,5 ml para frascos T75), garantindo a cobertura total da camada celular. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 10 minutos. Após a incubação, combine e centrifugue tanto a suspensão quanto as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspenda cuidadosamente o sedimento celular e transfira a suspensão celular para novos frascos contendo meio fresco. |
| Densidade de semeadura | 3-5 × 10⁵/ml |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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