Células 3D4/21
Informações gerais
| Descrição | A linhagem celular 3D4/21 é um modelo de macrófagos alveolares suínos amplamente utilizado em estudos envolvendo respostas imunológicas e infecções virais. Essas células são particularmente valiosas para pesquisas sobre infecções respiratórias em suínos, como as causadas pelo vírus da gripe suína (SIV) e pelo Senecavirus A (SVA). Devido à sua origem em macrófagos alveolares, as células 3D4/21 servem como um sistema in vitro essencial para examinar as interações hospedeiro-patógeno, com foco nos mecanismos imunológicos que os suínos mobilizam contra patógenos respiratórios. As células 3D4/21 são frequentemente utilizadas para explorar as vias moleculares acionadas durante as infecções. Por exemplo, no contexto das infecções por SIV, estudos demonstraram que as células 3D4/21 desencadeiam uma resposta imunológica por meio da expressão de várias citocinas e receptores de reconhecimento viral, como RIG-I e TLR7. Além disso, essas células têm sido fundamentais para identificar como diferentes moléculas de RNA, incluindo miRNAs, lncRNAs e circRNAs, contribuem para as redes regulatórias durante infecções virais, fornecendo insights sobre os mecanismos regulatórios do RNA endógeno competitivo (ceRNA) que auxiliam nas defesas antivirais. Isso tem sido particularmente útil para elucidar as respostas imunológicas desencadeadas por diferentes cepas de vírus da gripe suína, como o H1N1 e o H3N2. Além disso, as células 3D4/21 têm sido empregadas para estudar a autofagia e seu papel no controle de infecções. Por exemplo, durante a infecção por Haemophilus parasuis, essas células exibem respostas autofágicas reguladas pela via de sinalização da AMPK. Esse mecanismo de autofagia não apenas contribui para o controle da invasão bacteriana, mas também auxilia na compreensão da patogênese de doenças como a doença de Glässer, uma condição que afeta suínos sob estresse. Como resultado, a linhagem celular 3D4/21 continua sendo uma ferramenta valiosa para pesquisas imunológicas e sobre doenças infecciosas no contexto da saúde suína. |
|---|---|
| Organismo | Porco |
| Tecido | Pulmão |
| Sinônimos | IPAM 3D4/21, IPAM-WT |
Características
| Raça/Subespécie | Variedade local |
|---|---|
| Idade | 12 semanas |
| Gênero | Não especificado |
| Morfologia | Macrófago |
| Tipo de célula | Macrófago alveolar |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Dados regulatórios
| Referência | 3D4/21 (número de catálogo da Cytion 305357) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 2 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_0F14 |
Dados biomoleculares
| Vírus | Transformante: Vírus simiano 40 (SV40) |
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Manuseio
| Meio de cultura | RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Densidade de semeadura | 1-3*10⁴/cm² |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
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| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Controle de Qualidade e Análise Molecular
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
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