Células RBL-2H3 – Importância das células RBL-2H3 na resposta alérgica e em estudos imunológicos
A linhagem celular RBL-2H3 é uma linhagem de leucemia basofílica derivada de ratos, utilizada em pesquisas imunológicas. Ela serve como um sistema modelo para o estudo da fisiologia, do comportamento e das funções dos mastócitos. Essas células também são empregadas no estudo de reações alérgicas, processos imunológicos, bem como em testes e desenvolvimento de medicamentos.
- Meio de crescimento
- Para a cultura das células RBL-2H3, utiliza-se o meio EMEM contendo 10% de FBS, 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e sal EBSS. O meio deve ser trocado de 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação dos mastócitos RBL-2H3 é de aproximadamente 50 a 60 horas.
- Tipo de crescimento
- A RBL-2H3 é uma linhagem celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-2
- Disponível na
- Cytion — Encomende a RBL-2H3
- Células RBL-2H3: Origem e características gerais
- Células RBL-2H3: Informações sobre o cultivo
- Vantagens e limitações da linhagem celular de basófilos RBL-2H3
- Linha celular RBL-2H3: um marco na pesquisa imunológica
- Linha celular RBL-2H3: Perguntas frequentes essenciais para pesquisadores
- Referências
- Linha celular RBL-2H3 para pesquisa imunológica avançada
- Células RBL-2H3: Publicações científicas
- Recursos para a linha celular RBL-2H3: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Células RBL-2H3: Origem e características gerais
Antes de utilizar uma linha celular de basófilos em sua pesquisa, é importante conhecer sua origem e características gerais. Esta seção do artigo fornecerá informações básicas sobre as células RBL-2H3. Por exemplo: O que são os mastócitos RBL-2H3? Por que utilizar células RBL-2H3? O que são as células RBL-2H3 na leucemia basofílica de ratos? Qual é a morfologia das células RBL-2H3? As células RBL-2H3 são imortais?
- As células RBL-2H3 são células de leucemia basofílica derivadas de células basofílicas de ratos Wistar em 1978, no Laboratório de Imunologia do Instituto Nacional de Pesquisa Odontológica.
- As células RBL-2H3 possuem o receptor de tirosina quinase c-kit e receptores da protease II dos mastócitos (RMCP-II), o que as torna um modelo potencial de mastócitos. Portanto, são comumente chamadas de mastócitos, apesar de sua origem nos basófilos de ratos [1].
- Elas liberam histamina e outros mediadores após ativação e expressam receptores de IgE de alta afinidade.
- As células RBL-2H3 apresentam morfologia semelhante à dos fibroblastos.
Células RBL-2H3: Informações sobre cultura
Esta seção ajudará você a conhecer alguns aspectos fundamentais para a cultura da linhagem celular RBL-2H3. Você aprenderá: Qual é o tempo de duplicação das células RBL-2H3? Qual é a densidade de semeadura das células RBL-2H3? Qual é o protocolo de cultura das células RBL-2H3? Qual é o meio de congelamento da linha celular RBL-2H3?
Pontos-chave para a cultura de células RBL-2H3
Tempo de duplicação populacional:
O tempo de duplicação dos mastócitos RBL-2H3 é de aproximadamente 50 a 60 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A RBL-2H3 é uma linhagem celular aderente.
Proporção de subcultivo:
Para as células RBL-2H3, a proporção de subcultura é mantida entre 1:2 e 1:4. As células aderentes são lavadas com solução 1x PBS sem magnésio e cálcio. Adiciona-se a solução de passagem Accutase, e as células são mantidas à temperatura ambiente por 10 minutos para se desprendirem do fundo do recipiente de cultura. Adiciona-se meio fresco, e as células são centrifugadas. As células colhidas são cuidadosamente ressuspensas em meio fresco e transferidas para novos frascos contendo meio de crescimento.
Meio de crescimento:
Utiliza-se meio EMEM contendo 10% de FBS, 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e sal EBSS para a cultura das células RBL-2H3. O meio deve ser substituído de 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células RBL-2H3 são cultivadas em uma incubadora umidificada, ajustada a uma temperatura de 37 °C e conectada a uma fonte de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células são armazenadas na fase de vapor de nitrogênio líquido ou a uma temperatura inferior a -150 °C em um freezer elétrico para preservar a viabilidade celular a longo prazo.
Processo de congelamento e meio:
Utiliza-se o meio de congelamento CM-1 ou CM-ACF para congelar as células RBL-2H3 por meio de um processo de congelamento lento. Resumidamente, esse método permite uma redução de 1 °C na temperatura por minuto e protege as células contra o choque térmico.
Processo de descongelamento:
As células RBL-2H3 são descongeladas em um banho-maria pré-ajustado (37 °C) por aproximadamente 60 segundos. Em seguida, as células são adicionadas a um meio de cultura fresco e centrifugadas. Essa etapa é essencial para remover os componentes do meio de congelamento. Em seguida, o sedimento celular é ressuspenso em um meio de crescimento, e as células são transferidas para um frasco para cultura.
Nível de biossegurança:
As células RBL-2H3 devem ser mantidas em laboratórios de biossegurança nível 1.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Vantagens e limitações da linhagem celular de basófilos RBL-2H3
As células RBL-2H3 são comumente utilizadas em pesquisas imunológicas. Esta seção descreve suas principais vantagens e limitações.
Vantagens
- Fácil de cultivar: as células RBL-2H3 podem ser facilmente cultivadas e mantidas em ambiente laboratorial. Isso facilita a realização de experimentos econômicos e reproduzíveis, tornando-as uma escolha popular para estudos iniciais em imunologia.
Limitações
- Origem não humana: Por serem derivadas de basófilos de ratos, as células RBL-2H3 podem não reproduzir com precisão os processos biológicos humanos, o que pode limitar sua aplicabilidade em estudos de pesquisa específicos para humanos. Isso exige uma interpretação cautelosa dos dados ao extrapolar resultados para sistemas humanos.
- Modelo simplificado de mastócitos: Embora essas células ofereçam um modelo básico para o estudo das funções dos mastócitos, elas não representam totalmente a natureza complexa das interações dos mastócitos no sistema imunológico humano. Consequentemente, elas podem não modelar adequadamente os papéis multifacetados dos mastócitos nas respostas imunológicas ou em condições patológicas in vivo.
Linha celular RBL-2H3: um marco na pesquisa imunológica
Pesquisa com basófilos e mastócitos utilizando a linhagem celular RBL-2H3
A linha celular RBL-2H3, derivada de Rattus norvegicus, serve como um modelo fundamental para o estudo da biologia dos basófilos e mastócitos. Esses mastócitos de rato fornecem insights essenciais sobre a liberação de mediadores pelos mastócitos, fundamental para a compreensão de condições alérgicas, como a rinite alérgica. Por meio dessas células, os pesquisadores exploram a dinâmica dos receptores celulares e o estabelecimento de sinapses imunológicas, que são fundamentais para a resposta do sistema imunológico aos alérgenos. Um estudo interessante publicado em 2019 utilizou a linha celular RBL-2H3 e investigou os mecanismos por trás das reações pseudoalérgicas produzidas pela injeção de Qingkailing. O estudo constatou que a cascata de sinalização PI3K-RAC1 desencadeia parcialmente essa resposta alérgica nas células [2].
Dinâmica das sinapses imunológicas na pesquisa sobre alergias
Amplamente utilizadas na pesquisa em imunologia, as células RBL-2H3 são particularmente eficazes para investigar a dinâmica das sinapses imunológicas. Isso auxilia na elucidação dos processos de comunicação do sistema imunológico, com aplicações no estudo tanto dos mastócitos do sangue periférico quanto dos mastócitos peritoneais. Tal pesquisa é vital para uma compreensão abrangente da resposta imunológica, tanto em contextos sistêmicos quanto localizados.
Triagem de medicamentos e testes de toxicidade
Na triagem e nos testes de medicamentos, aproveita-se a capacidade de resposta das células RBL a vários estímulos, incluindo o estudo de como o H₂O₂ inibe as respostas mediadas por IgE. Essas células desempenham um papel essencial no desenvolvimento de tratamentos para doenças como infecções estreptocócicas, nas quais os estreptococos do grupo mitis inibem a ativação dos mastócitos. Além disso, pesquisadores avaliam os efeitos tóxicos de várias substâncias, incluindo produtos químicos, medicamentos e nanopartículas, utilizando esse modelo de mastócitos RBL 2H3. Por exemplo, um estudo recente (2022) avaliou a citotoxicidade de microplásticos de poliestireno nas células RBL-2H3. Os pesquisadores descobriram que os microplásticos danificam as organelas das células RBL-2H3 e promovem a morte celular [3]. Outro estudo de 2021 avaliou o potencial antialérgico e anti-inflamatório de um produto natural, a neferina, utilizando o modelo RBL 2H3 mc. O estudo revelou as boas propriedades antialérgicas e anti-inflamatórias do composto [4].
Metodologias avançadas em medição imunológica
A liberação consistente e mensurável de mediadores pelas células RBL-2H3 as torna ideais para a fluorimetria, facilitando medições precisas e exatas, cruciais para o estudo de doenças e a avaliação de agentes terapêuticos.
A linhagem celular RBL-2H3, originária do Rattus norvegicus, é um recurso inestimável tanto na pesquisa fundamental quanto na aplicada no campo da imunologia. Ela oferece oportunidades significativas para o avanço do nosso conhecimento e do tratamento de doenças imunológicas.
RBL-2H3 Cell Line for Advanced Immunological Research
RBL-2H3 cells: Research publications
The following are some exciting research publications featuring the RBL-2H3 mast cells:
Inhibitory activity of narirutin on RBL-2H3 cells degranulation
This research paper was published in the Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). The study proposed that narirutin, a natural compound, exerts inhibitory effects on RBL 2H3 degranulation via regulating NF-κB, MAPK, and the tyrosine kinase signalling pathway.
This research in the International Journal of Molecular Sciences (2020) proposed that the apigenin compound significantly suppresses allergic and inflammatory responses of RBL-2H3 and RAW264.7 cells. Therefore, it may serve as a potential agent for combating immune-related diseases.
This research paper in the International Journal of Molecular Sciences (2021) evaluated the anti-allergic and anti-inflammatory effects of a natural product, saponarin, using different cell lines, including RBL-2H3.
This Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) study found that Benchalokawichian extracts and some active constituents exert potential inhibitory effects on RBL 2H3 ß-hexosaminidase release.
This paper was published in 2018 in the International Journal of Biological Macromolecules. The study stated that spirulina maxima, a natural product, inhibits RBL 2H3 degranulation by preventing MAPKs and AKT phosphorylation.
Resources for RBL-2H3 cell line: Protocols, Videos, and More
RBL-2H3 is a widely used mast cell line. The available resources covering RBL-2H3 culturing and transfection protocols are mentioned here:
- RBL 2H3 MC model: This research article comprises protocols for maintaining RBL-2H3 cultures and for RBL-2H3 transfection.
Here are some resources explaining the RBL-2H3 cell culture protocol:
- RBL-2H3 cells: This website is beneficial for you to learn cell culture protocols for the RBL-2H3 cell line. Besides, it comprises information about RBL 2H3 cell media and culturing conditions.
RBL-2H3 Cell Line: Essential FAQs for Researchers
RBL-2H3 cells are a cell line originally derived from the rat basophilic leukemia and are commonly used as a model to study mast cell biology, particularly in the context of allergic reactions and immunological research. These cells are valuable for analyzing basophil and mast cell mediator release, cell receptor dynamics, and the formation of immunological synapses.
Yes, upon activation, RBL-2H3 cells are known to release histamine and other inflammatory mediators. This characteristic makes them highly useful for studies related to allergic responses, as histamine release is a key feature of allergic reactions and inflammatory processes.
The doubling time of RBL-2H3 cells varies depending on culture conditions but is generally around 24 to 36 hours. However, optimal growth conditions such as temperature, pH, and nutrient availability can influence the doubling time.
While RBL-2H3 cells are of rat origin and there are inherent differences between species, they are still widely used as a model to study mechanisms relevant to human allergic responses. However, results from RBL-2H3 cell studies should be carefully interpreted when extrapolating to human systems.
H2O2, or hydrogen peroxide, has been shown to inhibit IgE-mediated degranulation in RBL-2H3 cells. This effect is significant for researchers studying the modulation of allergic reactions at a cellular level.
Yes, RBL-2H3 cells are extensively used for drug screening, especially for compounds that target allergic and inflammatory pathways. They are used to evaluate the efficacy and safety of potential therapeutic agents, as well as their anti-allergic and anti-inflammatory properties.
References
- Passante, E. and N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudo-allergic reaction caused by Qingkailing injection partially via the PI3K-Rac1 signaling pathway in RBL-2H3 cells. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Polystyrene micro (nano) plastics damage the organelles of RBL-2H3 cells and promote MOAP-1 to induce apoptosis. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Anti-allergic and anti-inflammatory effects of neferine on RBL-2H3 cells. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.