תאי HEK293

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300192

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים HEK293, קו תאים אפיתלליים מהונדסים שפותח בשנות ה-70 על ידי אלכס ואן דר אב מאוניברסיטת אוטרכט מתאי כליה עובריים אנושיים, הפך למודל ניסויי מרכזי בביולוגיה מולקולרית וביישומים ביוטכנולוגיים בזכות הרבגוניות המדהימה שלו וקלות המניפולציה הגנטית. השינוי בקו התאים HEK293 כלל שילוב של קטע ספציפי מה-DNA של אדנו-וירוס 5, תוך הטמעת הגנים E1A ו-E1B של האדנו-וירוס בגנום התאי. שינוי ה-DNA של האדנו-וירוס איפשר לקווי התאים לקלוט DNA זר ביעילות, תכונה המכונה "יעילות טרנספקציה גבוהה". שילוב ה-DNA הנגיפי בגנום התא HEK293 הביא להנצחת התאים ושיפר משמעותית את השימושיות שלהם ביישומים ביוטכנולוגיים, בכך שהקל על שילוב וביטוי יציבים של DNA אקסוגני, תהליך המכונה טרנספקציה יציבה. יכולת זו מאפשרת נוכחות ותפקוד מתמשכים של גנים זרים בתוך התאים, מה שהופך את HEK293 לכלי יקר ערך למחקרים גנטיים וביוטכנולוגיה. כתוצאה מכך, תאי HEK293 הפכו למשאב בסיסי בביוטכנולוגיה לייצור חלבונים רקומביננטיים, כולל חלבונים טיפוליים חיוניים, ומשמשים כתאי מארח חזקים ליצירת וקטורים נגיפיים, במיוחד וקטורים אדנו-ויראליים ולנטי-ויראליים. תאי HEK 293 הם מרכזיים בתעשיית התרופות לבדיקות סריקה בעלות תפוקה גבוהה, לייצור טיפולים גנטיים המכוונים לגנים ספציפיים הקשורים להפרעות גנטיות בודדות, ולמחקרים על זיהום אדנו-ויראלי. בביוטכנולוגיה תעשייתית, השימוש בקו התאים האנושיים HEK293 משתרע על ייצור אנזימים רקומביננטיים, ייצור וקטורים נגיפיים, כגון וקטורים אדנו-נגיפיים, ייצור חלבונים ופיתוח ביוסנסורים. מחקר טוקסיקולוגי נהנה מיישום קו התאים HEK בהערכת ההשפעות של כימיקלים על ביולוגיה תאית, כולל ההשפעות על תאי כליה טיפוסיים והפוטנציאל לטיפולים גנטיים. היכולת של קו התאים האלמותי HEK293 לייצר ביעילות חלבונים מקוריים מדגישה את תפקידם החיוני במחקר רפואי, כולל מחקר סרטן וחקר היסודות של טיפול גנטי. תאי HEK293 מציעים פלטפורמה ייחודית לחקר ביולוגיה תאית וחלבונים מעניינים, ועולים על קווי תאים אחרים בגמישותם ובשימושיותם הן במחקר והן ביישומים תעשייתיים. לעומת זאת, תאי HEK293T, וריאנט של HEK293, עברו שינוי כדי לשפר את יעילות הטרנספקציה, תאי HEK293F הותאמו לתרבית בתמיסה כדי להקל על ייצור חלבונים בקנה מידה גדול, ושורות תאים יונקיים אחרים, כגון תאי Vero, שמקורם ברקמת כליה של קוף, משמשים בעיקר בפיתוח חיסונים ובמחקרים ויראליים.
אורגניזם	אדם
רקמה	כליה
יישומים	מארח טרנספקציה
מילים נרדפות	Hek293, HEK-293, HEK/293, HEK 293, HEK,293, 293, 293 HEK, 293 Ad5, כליה עוברת אנושית 293

גיל	עובר
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	שכבה אחת, דבוקה

ציטוט	HEK293 (מספר קטלוגי Cytion 300192)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_0045
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים זה, שמקורו בכליות עובריות HEK293, מכיל רצפים של אדנו-וירוס 5 E1A/E1B עקב שינוי, אך אינו משחרר נגיפים מדבקים, מה שמאפשר יכולת התרבות גבוהה. השינוי קיים באופן יציב בתאי הכליות העובריים. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

קולטנים מבוטאים	ויטרונקטין
ביטוי חלבון	CEA שלילי, p53 חיובי
Tumorigenic	בעכברים עירומים
רגישות לנגיפים	הוסב באמצעות DNA של אדנווירוס 5 DNA של אדנווירוס 5
סטטוס פלואידיות	30% מתאי HEK293 הם בעלי קריוטיפ היפותריפלואידי עם 64 כרומוזומים מודאליים. פלואידיות גבוהה יותר נמצאה ב-4.2% מהתאים.

תרבית ביניים	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	30 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר יניבו שכבה צפופה תוך כ-4 ימים.
חידוש נוזלים	פעמיים בשבוע
התאוששות לאחר הפשרה	לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
אללים HLA	A: 03:01:01 B: 07:02:01 C: 07:02:01 DRB1: 15:01:01 DQA1: 01:02:01 DQB1: 06:02:01 DPB1*: 04:01:01 E: 01:03:02

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300192-021123	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300192
300192-060922	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300192
300192-251124	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300192