תאי HEK293-F

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300260

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	תאי HEK293-F הם תת-קו תאים הצומחים במהירות וניתנים להנדסה גנטית בקלות, הנגזרים מקו התאים 293 של כליה עוברית אנושית (HEK293). האות 'F' מציינת שתאים אלה הותאמו לצמיחה בתרבויות תאים בתמיסה, מה שהופך אותם לשימושיים במיוחד לייצור חלבונים בקנה מידה גדול. התאים צומחים במגוון מצעי גידול נטולי סרום, מה שמקל על תהליכים הניתנים להרחבה ביישומים ביוטכנולוגיים ופרמצבטיים. תאי HEK293-F שומרים על המורפולוגיה האפיתלית של קו HEK293 ההורי ונשמרים בתרבית תאים בתמיסה ללא צורך בהיצמדות למצע מוצק. תאים אלה יעילים ביותר בביטוי חלבונים רקומביננטיים ומשמשים רבות בייצור וקטורים נגיפיים לטיפול גנטי, כולל וקטורים אדנו-נגיפיים, לנטו-נגיפיים ורטרו-נגיפיים. צמיחתם החזקה בתרבית בתמיסה וקלות הטרנספקציה שלהם הופכות אותם לאידיאליים לשימוש בפרוטוקולי טרנספקציה זמניים, בהם הם יכולים לייצר תשואות גבוהות של חלבון בתוך מספר ימים לאחר הטרנספקציה. מאפיין זה הוא קריטי למחזורי ייצור מהירים במחקר ובסביבות תעשייתיות. יכולת ההסתגלות של תאי HEK293-F לתנאי גידול שונים ויכולתם לגידול בצפיפות גבוהה משפרות את השימושיות שלהם בסביבות ביו-עיבוד.
אורגניזם	אדם
רקמה	כליה
יישומים	מארח טרנספקציה
מילים נרדפות	HEK-293-F, HEK 293-F, HEK-293F, HEK293F, 293-F, 293 F, 293F

גיל	עובר
מגדר	נקבה
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
תכונות צמיחה	השעיה

ציטוט	HEK293-F (מספר קטלוגי Cytion 300260)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_6642
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים HEK293-F זה מכיל SV40, מה שמאפשר יעילות טרנספקציה גבוהה וצמיחה איתנה בתרבית תאים בתמיסה. השינוי קיים באופן יציב בתאי כליה עובריים. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

קולטנים מבוטאים	ויטרונקטין
ביטוי חלבון	CEA שלילי, p53 חיובי
Tumorigenic	בעכברים עירומים
נגיפים	הוסב באמצעות DNA של אדנווירוס 5 DNA של אדנווירוס 5

תרבית ביניים	CD293 (Thermo)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	30 שעות
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר יניבו שכבה צפופה תוך כ-4 ימים.
חידוש נוזלים	פעמיים בשבוע
התאוששות לאחר הפשרה	לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300260-170225SF	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300260
300260-240326	תעודת ניתוח	04. May. 2026	300260

תאי HEK293-F

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)