תאי HEK293T
395.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
עובדות חיוניות אודות תאי HEK293T
| תיאור | HEK 293T, נגזרת בעלת יכולת טרנספקציה גבוהה של תא HEK 293 ההורי, בולטת ככלי רב-תכליתי ועוצמתי בתחום הביוטכנולוגיה לייצור חלבונים רקומביננטיים וסוגים שונים של חיסונים. תאי HEK-293T נוצרו על ידי טרנספקציה של תאי כליה עובריים 293 עם פלסמיד המקודד את האנטיגן T הגדול SV40. קו התאים HEK293 המקורי פותח מתאי אפיתל של רקמת כליה עוברת אנושית, והשינוי בו התרחש בניסוי ה-293 שביצעו החוקרים. בתחום פיתוח החיסונים, תאי הכליה העובריים 293T הם חיוניים לייצור וקטורים נגיפיים, כולל וקטורים אדנו-ויראליים. תאי HEK293T, בתנאי תרבית ספציפיים, עוברים טרנספקציה עם וקטורים הנושאים אלמנטים אדנו-ויראליים ורטרו-ויראליים, כולל מקור השכפול SV40, מה שמוביל לייצור חלקיקים דמויי נגיפים (VLPs). ה-VLPs, נטולי חומר גנטי נגיפי, הם מרכיב מרכזי ביצירת הבסיס לחיסונים מבוססי יחידות משנה ו-VLP. ייצור החלבון הרקומביננטי בתאי 293T מתאפשר באמצעות שיטות טרנספקציה שונות, עם דגש על יצירת חלבוני AP פיוז'ן וסוגים אחרים של חלבונים המהווים את המרכיב האנטיגני של חיסונים. יכולות הנדסת הגנום של קו התאים 293T מאפשרות התאמה אישית של קונסטרוקטים של ביטוי, מה שמגביר עוד יותר את ייצור הווקטורים הנגיפיים. זאת, בשילוב עם היכולת לייצר חלבונים בתרבית בתמיסה או בתנאים דבקים, הופכת את קו התאים 293T לפתרון מלא לפיתוח חיסונים מודרניים. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | כליה |
| יישומים | פיתוח חיסונים |
| מילים נרדפות | Hek293T, HEK-293T, HEK 293T, HEK-293-T, HEK 293 T, 293-T, 293 T, 293T, כליה עוברת אנושית 293T, 293tsA1609neo |
פרטים אודות HEK293
| גיל | עובר |
|---|---|
| מגדר | נקבה |
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
| תכונות צמיחה | דבק |
תיעוד
| ציטוט | HEK293T (מספר קטלוגי Cytion 300189) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0063 |
| סטטוס GMO | GMO-S1: קו תאים HEK293T זה מכיל SV40, התומך בביטוי ברמה גבוהה של פלסמידים שעברו טרנספקציה ובאריזה נגיפית יעילה. הקונסטרוקט משולב בתאי כליה עובריים אנושיים. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים |
פרופיל גנטי
| קולטנים מבוטאים | ויטרונקטין |
|---|---|
| ביטוי חלבון | CEA שלילי, p53 חיובי |
| Tumorigenic | בעכברים עירומים |
טיפול בתאי HEK 293T
| תרבית ביניים | EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA |
| חומר מפרק | אקוטאז |
| זמן הכפלה | 30 שעות |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| צפיפות זריעה | 1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה צפופה תוך כ-4 ימים. |
| חידוש נוזלים | פעמיים בשבוע |
| התאוששות לאחר הפשרה | לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות. |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| ציפוי בקבוק | אף אחד |
| הליך ההקפאה | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
אימות איכות תאי HEK
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 300189-050824 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300189 |
| 300189-160824 | תעודת ניתוח | 26. May. 2025 | 300189 |
-
מוצרים קשורים
מוצרים קשורים
תאי HEK293-FAPאורגניזם אדם רקמה כליה עוברית מחלה עבר שינוי/הונצח; אינו גורם לגידולים (על רקע HEK293) 2,200.00 $*