Lovo-Luc
1 072,26 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | LoVo-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine LoVo d’adénocarcinome colorectal, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur de luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale LoVo a été établie à partir d’un ganglion lymphatique supraclaviculaire gauche métastatique provenant d’un adénocarcinome colorectal chez un patient de 56 ans; elle compte parmi les lignées cellulaires de cancer colorectal les plus largement utilisées dans la recherche sur le cancer. Les cellules LoVo présentent une morphologie de type épithélial et se caractérisent par une instabilité des microsatellites (MSI), un déficit en réparation des mésappariements (dMMR) et l’expression d’oncogènes, notamment Myc, myb, ras, fos et p53. Ces caractéristiques font de LoVo un modèle pertinent pour l’étude de la biologie du cancer colorectal présentant un déficit de réparation des mésappariements et des réponses thérapeutiques, y compris la sensibilité à l’immunothérapie. L’intégration stable de la luciférase dans la lignée LoVo-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et quantitative de la charge tumorale dans des modèles de xénogreffes utilisant des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui facilite le suivi longitudinal non invasif de la prise de greffe, de la cinétique de croissance et de la réponse au traitement. La lignée LoVo-Luc est particulièrement utile pour les études précliniques évaluant les inhibiteurs de points de contrôle immunitaires, les agents chimiothérapeutiques et les thérapies ciblées dans le contexte du cancer colorectal présentant un déficit en MMR, ainsi que pour le criblage de médicaments à haut débit et les études mécanistiques de la biologie du cancer colorectal. LoVo-Luc conserve les caractéristiques moléculaires établies de la lignée parentale LoVo, notamment son phénotype MSI, son profil d’expression des oncogènes et la production de l’antigène carcino-embryonnaire (ACE). Le rapporteur luciférase améliore considérablement le débit expérimental et permet une évaluation pharmacodynamique en temps réel de l’efficacité du traitement. Les chercheurs doivent vérifier l’activité de la luciférase, le statut MMR et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation dans le cadre d’études précliniques à grande échelle. |
|---|---|
| Organisme | Humain |
| Tissu | Métastatique |
| Maladie | Adénocarcinome du côlon |
| Site métastatique | Ganglion lymphatique supraclaviculaire gauche |
Caractéristiques
| Âge | 56 ans |
|---|---|
| Genre | Homme |
| Origine ethnique | caucasien |
| Morphologie | De type épithélial |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | Lovo-Luc (numéro de catalogue Cytion 305682) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 9606 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_4Y03 |
| Statut OGM | GMO-S1 : Cette lignée cellulaire contient une cassette de rapporteur à base de luciférase de luciole (Luc2, optimisée au niveau des codons) intégrée de manière stable, introduite par transduction lentivirale à réplication incompétente. La population cellulaire polyclonale ainsi obtenue a été maintenue sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Un confinement de niveau S1 est requis. Cette classification s’applique uniquement en Allemagne et peut varier ailleurs. |
Données biomoléculaires
| Expression de l'antigène | HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, groupe sanguin B, Luc2 (luciole, codon optimisé) |
|---|---|
| Isoenzymes | G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1 |
| Oncogènes | Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src - |
| Tumorigène | Oui, chez les souris nues |
| Transcriptase inverse | Négatif |
| Produits | Antigène carcino-embryonnaire (ACE) : 908 ng/106 cellules/10 jours |
| Profil mutationnel | Mutation : p.Lys437Argfs*5, hétérozygote; Mutation : p.Arg1114Ter, hétérozygote; Mutation : p.Met1431fs*42, hétérozygote; Mutation : p.Arg2816Gln, hétérozygote; Mutation : p.Leu15Phefs*41, hétérozygote; Mutation : p.Arg505Cys, hétérozygote; Mutation : p.Gly13Asp, hétérozygote; Mutation : p.Ala292Val, hétérozygote; Mutation : p.Lys128Serfs*35, homozygote |
Manipulation
| Milieu de culture | HAMSF12 |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Temps de doublement | 24 à 48 heures |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Rapport de fractionnement | 1 à 3 |
| Densité de semis | de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm² |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation. |
| Décongélation et culture des cellules |
|
| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Site métastatique: | Ganglion lymphatique |
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