Cellules TC-1
759,00 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | La lignée cellulaire TC-1 est une lignée de cellules épithéliales pulmonaires murines transformées par les oncogènes E6 et E7 du virus du papillome humain de type 16 (VPH16), ainsi que par un oncogène H-ras activé. Cette lignée cellulaire a été développée à partir de cellules épithéliales pulmonaires primaires de souris C57BL/6 à l’aide d’une stratégie de transduction rétrovirale double. Au départ, un vecteur rétroviral dérivé du virus de la leucémie murine de Moloney (MoMLV), tel que le pLXSN-16E6E7, a été utilisé pour introduire les oncogènes E6 et E7. Dans ce vecteur, les gènes sont exprimés à partir du promoteur viral 5′ LTR, et un gène de résistance à la néomycine (NeoR), sous le contrôle d’un promoteur SV40 interne, a permis la sélection au moyen de G418. L’expression stable des gènes E6 et E7 entraîne l’inactivation des voies des suppresseurs de tumeurs p53 et Rb, ce qui conduit à l’immortalisation cellulaire. Après la sélection initiale, un deuxième vecteur rétroviral à base de MoMLV codant pour un gène H-ras activé (G12V) a été introduit pour parachever la transformation. Ce vecteur portait un marqueur de sélection différent, généralement un gène de résistance à l’hygromycine (hph), sous le contrôle d’un promoteur interne tel que SV40 ou PGK. Les cellules ayant survécu à une sélection séquentielle au G418 et à l’hygromycine ont démontré une intégration stable des trois oncogènes, ce qui a donné lieu à des cellules TC-1 entièrement transformées et immortalisées. Dans les études fonctionnelles, les cellules TC-1 présentent une forte expression des molécules du CMH de classe I, ce qui les rend hautement immunogènes et largement utilisées pour l’évaluation de vaccins expérimentaux et d’immunothérapies ciblant les tumeurs malignes associées au VPH. Elles ont joué un rôle déterminant dans les études précliniques sur les vaccins, en particulier celles visant à induire des réponses des lymphocytes T CD8+ contre la protéine E7 du VPH16. De plus, des sous-lignées présentant une expression réduite du CMH de classe I ont été développées afin de reproduire les mécanismes d’échappement immunitaire, ce qui permet de mieux comprendre l’interaction entre les cellules tumorales et l’immunité de l’hôte. Ces propriétés font de la lignée TC-1 un modèle robuste et polyvalent pour l’immuno-oncologie et le développement de vaccins contre le VPH. |
|---|---|
| Organisme | Souris |
Caractéristiques
| Genre | Non précisé |
|---|---|
| Origine ethnique | Non précisé |
| Morphologie | De type épithélial |
| Type de cellule | Épithélial |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | TC-1 (numéro de catalogue Cytion 305388) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10090 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_4699 |
| Statut OGM | GMO-S1 : Cette lignée cellulaire épithéliale pulmonaire murine (TC-1) contient les oncogènes E6/E7 du VPH16, introduits au moyen du vecteur rétroviral pLXSN16E6E7, ainsi que des séquences oncogéniques HRAS, ce qui favorise une transformation importante. Les inserts sont intégrés de façon stable. Cette classification s’applique uniquement en Allemagne et peut différer ailleurs. |
Données biomoléculaires
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Temps de doublement | 18,2 heures |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 305388-090725 | Certificat d'analyse | 18. Aug. 2025 | 305388 |
| 305388-260325 | Certificat d'analyse | 18. Aug. 2025 | 305388 |