Cellules PC-12
545,10 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | Les cellules PC-12 constituent une lignée cellulaire dérivée d’un phéochromocytome de la médullaire surrénale du rat. Ces cellules sont d’origine embryonnaire, se développent en adhésion et ressemblent à un mélange de cellules neuroblastiques et éosinophiles. Les cellules PC-12 sont des cellules catécholaminergiques qui synthétisent, stockent et libèrent de la norépinéphrine et de la dopamine. Elles ont un diamètre d’environ 10 à 12 microns et sont de petites cellules de forme irrégulière. La lignée cellulaire PC-12 constitue un modèle cellulaire neuronal classique en raison de sa capacité à acquérir les caractéristiques des neurones sympathiques lorsqu’elle est exposée au facteur de croissance nerveuse (NGF). Des études sur la régulation de la dopamine ont montré que les cellules PC-12 synthétisent, libèrent et réabsorbent la dopamine; elles ont fait l’objet d’une caractérisation approfondie en ce qui concerne la neurosécrétion ainsi que la présence de canaux ioniques et de récepteurs de neurotransmetteurs. De plus, la proportion relative des différents sous-types de canaux calciques varie au cours de la différenciation. La lignée cellulaire PC12 est un modèle cellulaire neuronal bien établi, particulièrement utile pour étudier les réponses cellulaires aux facteurs de croissance nerveuse (NGF) et la manière dont celles-ci conduisent à l’expression de protéines spécifiques à la différenciation ainsi qu’à la différenciation elle-même. Lorsqu’elles sont cultivées en présence de NGF, les cellules PC12 se différencient en neurones ganglionnaires sympathiques, tant sur le plan morphologique que fonctionnel. La différenciation résulte de l’induction réversible d’un phénotype neuronal par le NGF. Il a été démontré qu’un revêtement de collagène favorise l’acquisition de caractéristiques neuronales, notamment en termes de longueur et de densité des neurites, lors d’un traitement au NGF. Les cellules PC12 sont tumorigènes et proviennent de rats mâles de la souche du New England Deaconess Hospital. La lignée cellulaire PC-12 possède 40 chromosomes, soit 38 autosomes, plus les chromosomes X et Y. Le facteur de croissance nerveux (NGF) est exprimé dans les cellules PC-12, et l’exposition au NGF constitue un régulateur crucial de la différenciation cellulaire. En conclusion, les cellules PC-12 constituent un système modèle polyvalent et largement utilisé en neurobiologie en raison de leur capacité à acquérir les caractéristiques des neurones sympathiques lorsqu’elles sont exposées au facteur de croissance nerveuse (NGF). Ces cellules ont fait l’objet d’une caractérisation approfondie en ce qui concerne la neurosécrétion, les canaux ioniques et les récepteurs des neurotransmetteurs. Leur extrême polyvalence pour les essais pharmacologiques et leur utilisation comme modèle établi pour l’étude de la prolifération et de la différenciation des cellules neuronales en font un outil précieux dans la recherche en neurobiologie. |
|---|---|
| Organisme | Rat |
| Tissu | Glande surrénale |
| Maladie | Phéochromocytome |
| Site métastatique | Sans objet (phéochromocytome de la médullosurrénale; la tumeur primaire est située dans la glande surrénale) |
| Applications | Recherche en neurobiologie; différenciation neuronale induite par le NGF; physiologie de la dopamine et des catécholamines; neurosécrétion; canaux ioniques (calcium, sodium); pharmacologie des récepteurs des neurotransmetteurs; criblage des agents neuroprotecteurs; modèles de la maladie de Parkinson |
| Synonymes | PC 12, PC12 |
Caractéristiques
| Âge | Non précisé |
|---|---|
| Genre | Homme |
| Origine ethnique | Japonais |
| Morphologie | Polygonal |
| Type de cellule | Cellules de phéochromocytome (neuroendocrines/chromaffines) |
| Propriétés de croissance | Adhérent/En suspension (se développe en tant qu’organisme adhérent sur des surfaces recouvertes de collagène; forme également des agrégats en suspension) |
Données réglementaires
| Référence | PC-12 (numéro de catalogue Cytion 500311) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10116 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_S979 |
| Statut OGM | Sans modification génétique; lignée cellulaire de phéochromocytome de rat de type sauvage |
Données biomoléculaires
| Récepteurs exprimés | Facteur de croissance nerveuse (NGF) |
|---|---|
| Tumorigène | Oui, au New England Deaconess Hospital, on élève des rats de souche |
| Produits | Catécholamines, dopamine |
| Caryotype | 40 chromosomes, 38 autosomes plus xY |
Manipulation
| Milieu de culture | RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | TrypLE Express (adhérent au collagène); pipetage et remise en suspension pour culture en suspension |
| Repiquage | Cellules en suspension : Retirez les cellules du substrat en pipettant avec du milieu frais. Pour obtenir des cellules isolées, faites passer la suspension plusieurs fois à travers une aiguille de calibre 22, puis répartissez-la dans de nouveaux flacons. Culture sur collagène : Pour détacher les cellules adhérentes, suivez le protocole standard suivant. Retirez le milieu de culture et rincez les cellules adhérentes à l’aide de PBS sans calcium ni magnésium (3 à 5 ml de PBS pour les flacons de culture cellulaire T25, 5 à 10 ml pour les flacons T75). Ajouter du TrypleExpress (1 à 2 ml par flacon de culture cellulaire T25, 2,5 ml par flacon T75); la couche cellulaire doit être entièrement recouverte. Incuber à 37 degrés Celsius pendant 10 minutes. Remettez soigneusement les cellules en suspension; l’ajout de milieu est facultatif mais non nécessaire, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais. |
| Densité de semis | 1 × 10⁴ cellules/cm² |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Rétablissement après le dégel | Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 48 heures. |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un mélange composé de 50 % de milieu de base + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, ou du CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés afin d’améliorer la récupération et de réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Revêtement des flacons | Collagène |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
|---|
Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 500311-170524 | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 500311 |
| 500311-270923 | Certificat d'analyse | 21. Jul. 2025 | 500311 |
| 500311-220825 | Certificat d'analyse | 05. Dec. 2025 | 500311 |