Cellules P19
545,10 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | La lignée cellulaire P19, un type de carcinome embryonnaire pluripotent, a été initialement obtenue à partir d’un tératocarcinome chez une souris de souche C3H/He. Cette lignée cellulaire de type épithélial présente une grande capacité de clonage lorsqu’elle est cultivée dans un milieu enrichi de 0,1 mM de β-mercaptoéthanol. Une caractéristique notable des cellules P19 est leur capacité à se différencier en cellules neuronales et gliales lorsqu’elles sont exposées à l’acide rétinoïque. Parallèlement, elles ont le potentiel de se transformer en muscles cardiaques et squelettiques lorsqu’elles sont exposées au diméthylsulfoxyde (DMSO). Lorsqu’elles sont soumises à la fois à l’acide rétinoïque et au DMSO, elles présentent principalement les caractéristiques d’une différenciation induite par l’acide rétinoïque. La lignée cellulaire P19 provient de la souris (Mus musculus) et appartient à la classification générale suivante : Eukaryota, Animalia, Metazoa, Chordata, Vertebrata et Tetrapod. Ces cellules présentent la morphologie d’un tissu épithélial d’origine embryonnaire et sont associées à la maladie appelée tératocarcinome. Elles sont principalement utilisées dans des applications de culture cellulaire en 3D au sein de la catégorie de produits des cellules animales. Bien que les cellules cancéreuses constituent une menace importante pour la santé en raison de leur croissance rapide et agressive, elles offrent également une ressource inestimable aux chercheurs qui étudient le développement des cellules cancéreuses et cherchent des traitements plus ciblés. En 1982, la lignée cellulaire P19 a été créée lorsque McBurney et Rogers ont transplanté un embryon de souris de 7,5 jours dans un testicule afin d’induire la croissance d’une tumeur. Ils ont réussi à isoler des cultures cellulaires à partir de la tumeur primaire contenant des cellules souches indifférenciées, appelées cellules de carcinome embryonnaire P19. Ces cellules présentaient une croissance rapide sans nécessiter de cellules nourricières et étaient faciles à cultiver. Une injection ultérieure dans des blastocystes d’une autre souche de souris a confirmé la multipotence des cellules P19, puisque des tissus issus des trois feuillets germinaux se sont développés chez la souris receveuse. Plusieurs lignées cellulaires de sous-types ont été dérivées des cellules P19 d’origine, notamment les lignées P19S18, P19D3, P19RAC65 et P19C16. Chacun de ces sous-types possède des capacités de différenciation uniques en cellules neuronales ou musculaires lorsqu’il est traité respectivement avec de l’acide rétinoïque ou du DMSO. Des études plus récentes ont permis de générer des lignées cellulaires dérivées de cellules P19 différenciées qui, grâce à la pluripotence des cellules P19, peuvent se transformer en cellules de type ectoderme, mésoderme et endoderme. Les cellules P19 sont connues pour leur croissance soutenue dans des milieux enrichis en sérum. Leur différenciation peut être contrôlée efficacement à l’aide de médicaments non toxiques tels que l’acide rétinoïque, ce qui conduit au développement de neurones, d’astrocytes et de microglies. D’autre part, les agrégats de cellules P19 exposés au DMSO se différencient en dérivés endodermiques et mésodermiques, notamment en muscles cardiaques et squelettiques. Les cellules P19 se prêtent également à la transfection avec de l’ADN codant pour des gènes recombinants, et des lignées stables exprimant ces gènes peuvent être facilement isolées. Cette malléabilité et cette polyvalence font des cellules P19 une excellente ressource pour l’étude des mécanismes moléculaires qui régissent les décisions développementales des cellules pluripotentes en cours de différenciation. |
|---|---|
| Organisme | Souris |
| Tissu | Testicule |
| Maladie | Tératocarcinome |
| Synonymes | P-19 |
Caractéristiques
| Race/Sous-espèce | C3H/He |
|---|---|
| Genre | Homme |
| Morphologie | De type fibroblaste |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | P19 (numéro de catalogue Cytion 400416) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10090 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_2153 |
Données biomoléculaires
| Caryotype | N = 40, xY |
|---|
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez le milieu de culture et rincez les cellules adhérentes à l’aide de PBS sans calcium ni magnésium (3 à 5 ml de PBS pour les flacons de culture T25, 5 à 10 ml pour les flacons T75). Ajouter du TrypleExpress (1 à 2 ml par flacon de culture cellulaire T25, 2,5 ml par flacon T75); la couche cellulaire doit être entièrement recouverte. Incuber à 37 degrés Celsius pendant 10 minutes. Remettez soigneusement les cellules en suspension; l’ajout de milieu est facultatif mais non nécessaire, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais. Ne laissez pas les cellules atteindre la confluence. Effectuez une sous-culture au moins toutes les 48 heures. |
| Densité de semis | Effectuer une culture au moins toutes les 48 heures |
| Renouvellement des fluides | Tous les deux jours |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 400416-619 | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 400416 |