Cellules MB49-Luc
1 104,00 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | MB49-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire murine MB49 issue d’un carcinome à cellules transitionnelles de la vessie, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur codant pour la luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale MB49 a été initialement induite par le 7,12-diméthylbenz[a]anthracène (DMBA) chez une souris C57BL/6 et est largement utilisée comme modèle syngénique de carcinome urothélial chez des hôtes C57BL/6 immunocompétents. Les cellules MB49 présentent une morphologie épithéliale et expriment des antigènes du CMH de classe I, ce qui les rend immunologiquement reconnaissables par le système immunitaire de l’hôte et en fait donc un modèle précieux pour l’étude des interactions tumeur-système immunitaire, des approches d’immunothérapie et des mécanismes d’échappement immunitaire dans le cancer de la vessie. L’intégration stable de la luciférase dans les cellules MB49-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et non invasive de la charge tumorale dans des modèles orthotopiques intravésicaux et sous-cutanés chez des souris syngéniques C57BL/6. Le signal émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet une évaluation longitudinale de la prise de greffe tumorale, de la progression de la tumeur de la vessie et de la réponse thérapeutique sans avoir recours à des procédures invasives répétées. La lignée MB49-Luc est particulièrement utile pour évaluer les schémas d’immunothérapie intravésicale, les inhibiteurs de points de contrôle systémiques et les nouvelles modalités thérapeutiques pour le cancer de la vessie avec ou sans invasion musculaire dans des modèles précliniques immunocompétents. MB49-Luc conserve les principales caractéristiques biologiques et immunologiques de la lignée parentale MB49, notamment sa compatibilité syngénique avec la souche C57BL/6 et sa particularité caryotypique caractéristique, à savoir la perte du chromosome Y. Le rapporteur luciférase améliore la sensibilité expérimentale et permet un suivi en temps réel de la tumeur. Les chercheurs doivent confirmer l’activité de la luciférase, la cinétique de croissance et le phénotype immunologique dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation in vivo à grande échelle. |
|---|---|
| Organisme | Souris |
| Tissu | Vessie |
| Maladie | Carcinome à cellules transitionnelles de la vessie chez la souris |
| Synonymes | MB49-luciférase, MB49 LucSH+ |
Caractéristiques
| Âge | Adulte |
|---|---|
| Genre | Homme |
| Origine ethnique | Souche de souris consanguine (C57BL/6) |
| Morphologie | Épithélial |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | MB49-Luc (numéro de catalogue Cytion 305681) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10090 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_E8D4 |
| Statut OGM | GMO-S1 : Cette lignée cellulaire contient une cassette de rapporteur à base de luciférase de luciole (Luc2, optimisée au niveau des codons) intégrée de manière stable, introduite par transduction lentivirale à réplication incompétente. La population cellulaire polyclonale ainsi obtenue a été maintenue sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Un confinement de niveau S1 est requis. Cette classification s’applique uniquement en Allemagne et peut varier ailleurs. |
Données biomoléculaires
| Expression des protéines | Luc |
|---|---|
| Expression de l'antigène | Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons) |
| Caryotype | A perdu le chromosome Y |
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase : 10 minutes à température ambiante |
| Temps de doublement | 24 à 48 heures |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Rapport de fractionnement | 1 à 3 |
| Densité de semis | de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm² |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation. |
| Décongélation et culture des cellules |
|
| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 305681-180526 | Certificat d'analyse | 03. Jul. 2026 | 305681 |