Cellules LM/TK (LMTK-)
545,10 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | La lignée cellulaire LM/TK- (LMTK-) est dérivée de fibroblastes murins et se caractérise par l’absence d’activité de la thymidine kinase (TK). Cette lignée cellulaire est particulièrement utile dans la recherche en biologie génétique et moléculaire, où elle sert de système modèle pour l’étude de la fonction des gènes, de la réplication de l’ADN et de la recombinaison. L’absence de TK dans ces cellules permet la sélection de mutants ou de cellules recombinantes ayant retrouvé une activité TK, ce qui les rend précieuses dans les études portant sur des mutants déficients en TK et pour la sélection de clones TK-positifs à la suite d’une transfection avec de l’ADN exogène. Cette lignée cellulaire, dérivée d’une sous-lignée de la lignée de fibroblastes de souris L-M résistante au BUdR, peut être utilisée pour des études génétiques et biochimiques telles que le transfert de gènes et l’hybridation de cellules somatiques. Les cellules LM/TK- sont couramment utilisées dans la recherche portant sur le gène de la thymidine kinase du virus de l’herpès simplex (HSV), car elles constituent un support essentiel pour la sélection de transformants du gène HSV-TK. Cela a des implications importantes dans la recherche en thérapie génique, où l’HSV-TK est utilisé dans des stratégies de thérapie génique suicidaire visant à détruire sélectivement les cellules cancéreuses. De plus, ces cellules sont utilisées dans la production de virus recombinants ainsi que dans l’analyse de l’expression et de la réplication des gènes viraux. La lignée cellulaire LMTK- joue ainsi un rôle essentiel dans l’avancement de notre compréhension de la manipulation génétique et dans l’élaboration de stratégies thérapeutiques. |
|---|---|
| Organisme | Souris |
| Tissu | Tissu conjonctif sous-cutané, aréole mammaire et tissu adipeux |
| Synonymes | L-M[TK-], LM TK négatif, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, cellules L (TK-), L(TK-), L(tk-) |
Caractéristiques
| Race/Sous-espèce | C3H/An |
|---|---|
| Âge | 100 jours |
| Genre | Homme |
| Morphologie | De type fibroblaste |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | LM/TK(LMTK-) (numéro de catalogue Cytion 305176) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10090 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_4536 |
Données biomoléculaires
| Expression de l'antigène | H-2k |
|---|---|
| Tumorigène | Oui, chez les souris nues (des tumeurs se sont développées en moins de 21 jours avec une fréquence de 100 % (5/5) chez les souris nues ayant reçu une inoculation sous-cutanée de 1 × 10⁷ cellules). |
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Renouvellement des fluides | 2 fois par semaine |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 305176-100725 | Certificat d'analyse | 18. Aug. 2025 | 305176 |