Cellules LLC-PK1
545,10 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | Les cellules LLC-PK1 constituent une lignée cellulaire bien établie et largement utilisée dans la recherche biomédicale. Ces cellules proviennent du rein d’un porc mâle en bonne santé et présentent une morphologie épithéliale typique. La lignée LLC-PK1 est polarisée et comporte des jonctions serrées, ce qui en fait un modèle idéal pour les tissus épithéliaux. L’une des caractéristiques essentielles des cellules LLC-PK1 est leur capacité à produire de l’activateur du plasminogène, une substance qui stimule la fibrinolyse. Cette propriété a rendu les cellules LLC-PK1 particulièrement précieuses dans la recherche sur la thrombose. Ces dernières années, l’activateur du plasminogène a été intégré à des médicaments utilisés dans les traitements de la thrombose, car il facilite la dissolution des petits caillots sanguins. En plus de produire des activateurs du plasminogène, les cellules LLC-PK1 produisent de grandes quantités de cytokératine. Cette caractéristique les a rendues très prisées pour diverses recherches pharmacologiques et métaboliques. La lignée LLC-PK1 a été utilisée dans des études sur le métabolisme, le transport, la toxicité et les interactions des médicaments. Les cellules LLC-PK1 sont également fréquemment utilisées dans les tests de perméabilité. Le mécanisme de transport de l’uracile diffère selon les lignées cellulaires : on observe un système indépendant du Na+ sur la membrane basolatérale des cellules Caco-2, tandis que les cellules LLC-PK1 présentent à la fois des systèmes dépendants et indépendants du Na+ sur la membrane apicale. Comparativement à d’autres lignées cellulaires, les cellules LLC-PK1 partagent de nombreuses caractéristiques des cellules tubulaires proximales in vivo, notamment la présence de microvillosités sur la membrane apicale, une activité élevée des enzymes de la membrane apicale, ainsi que l’expression de récepteurs de l’hormone parathyroïdienne et de transporteurs de glucose dépendants du sodium. Cela fait des cellules LLC-PK1 un outil précieux dans les études de toxicologie rénale. Une autre lignée cellulaire couramment utilisée dans les études de toxicologie rénale est la lignée cellulaire MDCK. À l’instar des cellules LLC-PK1, les cellules MDCK sont épithéliales, mais présentent des caractéristiques plus typiques des cellules tubulaires distales. Elles expriment des récepteurs de la vasopressine, de l’ocytocine et des prostaglandines qui, lorsqu’ils sont stimulés, activent l’adénylate cyclase. Les lignées cellulaires LLC-PK1 et MDCK prolifèrent rapidement et peuvent être repiquées facilement pendant de nombreuses générations dans des cultures monocouches. Les cellules LLC-PK1 sont également capables de former des « dômes », des cloques remplies de liquide résultant du transport de l’eau et des solutés, des jonctions serrées et de l’adhésion des cellules au substrat. En conclusion, la lignée cellulaire LLC-PK1 constitue un outil polyvalent et précieux pour la recherche biomédicale. Elle a été largement utilisée dans diverses études portant sur le métabolisme des médicaments, le transport des médicaments, la toxicité des médicaments, les interactions médicamenteuses, la toxicologie rénale et les essais de perméabilité. Grâce à leur morphologie épithéliale bien établie et à leur production d’activateur du plasminogène et de cytokératine, les cellules LLC-PK1 constituent un modèle idéal pour les tissus épithéliaux. |
|---|---|
| Organisme | Sus Scrofa |
| Tissu | Rein |
| Applications | Métabolisme des médicaments, essais de perméabilité, toxicité et études d'interactions. |
| Synonymes | LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1 |
Caractéristiques
| Race/Sous-espèce | Hampshire |
|---|---|
| Âge | 3 à 4 semaines |
| Genre | Homme |
| Morphologie | De type épithélial |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | LLC-PK1 (numéro de catalogue Cytion 607264) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | La lignée cellulaire contient des séquences et des transcrits de l’oncovirus porcin de type C (PCOV). Le mode d’infection n’est pas déterminé, et une sécrétion virale ne peut être exclue. En Allemagne, ces virus sont classés au niveau BSL 1 pour les humains et au niveau BSL 2 pour les animaux (TRBA 462). Toutefois, le Comité central allemand de sécurité biologique (ZKBS) classe ces virus et les lignées cellulaires infectées au niveau BSL 2 pour les applications de modification génétique. |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 9823 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_0391 |
Données biomoléculaires
| Virus | Contient des séquences et des transcrits de l'oncovirus porcin de type C (PCOV). L'expression du virus ne peut être exclue. |
|---|---|
| Produits | Activateur du plasminogène |
Manipulation
| Milieu de culture | Milieu 199, contenant 2,7 mM de glutamine stable, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820101a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 3 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Recueillez les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et lavez délicatement les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (utilisez 3 à 5 ml pour les flacons T25 et 5 à 10 ml pour les flacons T75). Appliquez de l’Accutase (1 à 2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à bien recouvrir toute la couche cellulaire. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l’incubation, combinez la suspension et les cellules adhérentes, puis centrifugez le tout. Après la centrifugation, remettez soigneusement le culot cellulaire en suspension et transférez la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais. |
| Densité de semis | de 1 à 3 × 10⁶ cellules/cm² |
| Renouvellement des fluides | Tous les trois jours |
| Rétablissement après le dégel | Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures. |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 607264-030725 | Certificat d'analyse | 18. Aug. 2025 | 607264 |