Cellules L-929-GFP

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 104,00 CAD$*

Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10^⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10^⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

cryovial

Numéro de produit : 305956

Fiche signalétique

Fiche de produit

Description	Les cellules L-929-GFP sont un dérivé marqué par fluorescence de la lignée cellulaire murine de fibroblastes L-929, initialement établie à partir du tissu conjonctif sous-cutané d’une souris adulte. La lignée parentale L-929 est l’un des modèles de fibroblastes murins les plus largement utilisés en recherche biomédicale; elle se caractérise par sa croissance adhérente, sa morphologie fusiforme et sa forte capacité de prolifération. Les cellules L-929 sont largement utilisées dans les études sur la cytotoxicité, l’inflammation, la biologie de la matrice extracellulaire et les interactions hôte-pathogène; elles sont également couramment employées pour la production et l’analyse biologique de cytokines telles que le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α). L’expression stable de la protéine fluorescente verte (GFP) dans les cellules L-929-GFP permet la visualisation directe et le suivi quantitatif du comportement des fibroblastes en temps réel. Ces cellules sont particulièrement utiles pour les applications basées sur la fluorescence, notamment les tests de migration, les expériences de co-culture, les études d’ingénierie tissulaire et l’imagerie de cellules vivantes. Les cellules L-929-GFP conservent les caractéristiques biologiques fondamentales de la lignée de fibroblastes parentale tout en offrant une utilité accrue pour le suivi de la localisation, de la prolifération et des interactions cellulaires au sein d’environnements cellulaires complexes. Par conséquent, elles constituent un modèle polyvalent pour l’étude de la dynamique des cellules stromales, des processus de cicatrisation, de la compatibilité des biomatériaux et des réponses cytotoxiques à médiation immunitaire. Modification génétique : Modifiées de façon stable par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer le rapporteur protéique fluorescent vert ZsGreen1; maintenues sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Niveau de confinement S1/BSL-1.
Organisme	Souris
Tissu	Tissu conjonctif
Synonymes	L929/GL50

Âge	100 jours
Genre	Homme
Type de cellule	Fibroblaste
Propriétés de croissance	Adepte

Référence	L929-GFP (numéro de catalogue Cytion 305956)
Niveau de biosécurité	1
NCBI_Numéro d'identification fiscale	10090
Cellosaurus - Numéro d'enregistrement	CVCL_E2Z7
Statut OGM	GMO-S1 : Cette lignée cellulaire contient un rapporteur à base de protéine fluorescente verte ZsGreen1 intégré de manière stable, introduit par transduction lentivirale à réplication incompétente. La population cellulaire polyclonale ainsi obtenue a été maintenue sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Un confinement de niveau S1 est requis. Cette classification s’applique uniquement en Allemagne et peut varier ailleurs.

Expression de l'antigène	ZsGreen1 (protéine fluorescente verte)

Milieu de culture	DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
Suppléments	Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Réactif de dissociation	Accutase
Repiquage	Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis	de 1 à 3 × 10^⁴ ^cellules/cm^²
Milieu de congélation	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Décongélation et culture des cellules	Assurez-vous que le flacon reste bien congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche afin de maintenir des températures optimales pendant le transport. À la réception, conservez immédiatement le cryofiole à une température inférieure à -150 °C pour garantir la préservation de l’intégrité cellulaire, ou passez à l’étape 3 si une culture immédiate est nécessaire. Pour une culture immédiate, décongelez rapidement le flacon en l’immergeant dans un bain-marie à 37 °C contenant de l’eau propre et un agent antimicrobien, en agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace. Effectuez toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux laminaire, en désinfectant le cryotube avec de l’éthanol à 70 % avant de l’ouvrir. Ouvrez avec précaution le flacon désinfecté et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant délicatement. Centrifuger le mélange à 200 x g pendant 5 minutes, puis jeter avec précaution le surnageant contenant le milieu de congélation. Suivre la procédure décrite dans la section « Récupération après décongélation ».
Atmosphère d'incubation	37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'entreposage	Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Cellules L-929-GFP

Renseignements généraux

Caractéristiques

Données réglementaires

Données biomoléculaires

Manipulation

Contrôle de la qualité et analyse moléculaire