Cellules Hep-64.1
897,00 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | La lignée cellulaire d’hépatome Hep-64.1 est issue d’une tumeur hépatique de souris, plus précisément de la souche C57BL/6J. Cette lignée cellulaire se distingue par son origine hépatocytaire, confirmée par l’analyse des protéines des filaments intermédiaires. La lignée Hep-64.1 exprime les kératines simples K8 et K18, caractéristiques des cellules hépatiques normales, ainsi que la vimentine et la kératine K19 à des degrés divers. Ces profils protéiques confirment la nature hépatocytaire de la lignée cellulaire et sa classification en tant que lignée d’hépatome. La lignée cellulaire Hep-64.1 présente une morphologie principalement épithéliale, reflétant son origine hépatocytaire. Ce phénotype morphologique concorde avec son profil d’expression protéique. L’analyse par empreinte génétique de la lignée Hep-64.1 n’a révélé aucune anomalie structurelle majeure, ce qui indique un certain degré de stabilité génomique. Toutefois, certains changements dans les intensités relatives de bandes spécifiques ont été observés à mesure que le nombre de passages augmentait, ce qui suggère une variabilité génomique mineure au cours de périodes de culture prolongées. Malgré l’absence de mutations détectables du gène p53 dans les tumeurs hépatiques primaires de souris, des aberrations ont été observées dans certaines lignées d’hépatome au cours de leur propagation in vitro. La lignée cellulaire Hep-64.1 a fait l’objet d’une analyse visant à détecter des mutations dans les gènes p53 et c-Ha-ras. L’absence de mutations détectables dans le gène p53 de cette lignée au cours des premiers passages suggère un fond génétique stable. Cette lignée cellulaire constitue un modèle précieux pour l’étude du carcinome hépatocellulaire, fournissant des informations sur les mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents à la tumorigenèse hépatique. |
|---|---|
| Organisme | Souris |
| Tissu | Foie |
| Maladie | Carcinome hépatocellulaire |
| Synonymes | HEP-64.1, 64.1 |
Caractéristiques
| Race/Sous-espèce | C57BL/6J |
|---|---|
| Âge | Adulte |
| Genre | Femme |
| Morphologie | De type épithélial |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | Hep-64.1 (numéro de catalogue Cytion 400205) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10090 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_5770 |
Données biomoléculaires
| Expression des protéines | Kératine 8, Kératine 18, Kératine 19, Vimentine |
|---|---|
| Profil mutationnel | P53 de type sauvage |
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Renouvellement des fluides | Tous les 3 à 5 jours |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 400205-320SF | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 400205 |
| 400205-220425 | Certificat d'analyse | 21. Jul. 2025 | 400205 |