Cellules HTR-8/SVneo
545,10 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | HTR-8/SVneo est une lignée cellulaire trophoblastique humaine dérivée des villosités choriales d’un placenta du premier trimestre, plus précisément d’un embryon âgé de 6 à 12 semaines. Ces cellules ont été immortalisées par transfection avec le gène codant pour le grand antigène T du virus simien 40 (SV40), ce qui prolonge leur durée de vie tout en conservant les caractéristiques typiques des trophoblastes invasifs extravillos. Cette lignée cellulaire exprime plusieurs marqueurs clés associés aux trophoblastes invasifs extravillos, notamment le facteur de croissance analogue à l’insuline II (IGF-II), le NDOG-5, l’antigène nucléaire des cellules en prolifération (PCNA) et toute une gamme d’intégrines (sous-unités α1, α3, α5, αv et β1, ainsi que le récepteur de la vitronectine αvβ3/β5). Elle est négative pour le marqueur des macrophages 63/D3, le facteur VIII (marqueur des cellules endothéliales) et les sous-unités d’intégrines α6 et β4, ce qui confirme son origine trophoblastique et la distingue d’autres types cellulaires tels que les macrophages et les cellules endothéliales. Les cellules HTR-8/SVneo sont largement utilisées comme modèle pour étudier l’invasion trophoblastique et la biologie placentaire, en particulier la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), qui est cruciale pour le comportement invasif des trophoblastes au cours du développement placentaire. Des recherches ont montré que ces cellules présentent une population mixte de phénotypes épithéliaux et mésenchymateux, avec la capacité de subir une EMT dans des conditions de culture standard. Cette transition est médiée par la voie de signalisation du TGF-β, qui favorise le phénotype mésenchymateux, comme en témoignent la surexpression de marqueurs mésenchymateux tels que la vimentine et la sous-expression de marqueurs épithéliaux comme l’E-cadhérine. Cela fait de HTR-8/SVneo un modèle in vitro précieux pour l’étude des mécanismes moléculaires sous-jacents à la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT) chez les trophoblastes et de ses implications tant dans le développement placentaire normal que dans les troubles liés à la grossesse. Des études ont en outre démontré que les cellules HTR-8/SVneo peuvent former des sphéroïdes, qui expriment principalement des marqueurs épithéliaux. Lorsque ces sphéroïdes sont repiqués en culture 2D, les cellules présentent une évolution vers un phénotype mésenchymateux, indiquant un processus d’EMT en cours. Les propriétés uniques de cette lignée cellulaire, notamment sa réactivité au TGF-β et sa nature mixte épithélio-mésenchymateuse, fournissent des informations essentielles sur la dynamique cellulaire complexe de l’invasion trophoblastique et la régulation du développement placentaire, offrant ainsi une plateforme robuste pour l’étude des pathologies liées à la grossesse, telles que la prééclampsie et le retard de croissance intra-utérin. |
|---|---|
| Organisme | Humain |
| Tissu | Trophoblaste, placenta |
| Synonymes | HTR-8/SV neo, HTR-8/SV-neo, HTR8/SVneo, HTR8svn |
Caractéristiques
| Âge | 6 à 12 semaines de gestation |
|---|---|
| Genre | Non précisé |
| Morphologie | Un mélange de cellules épithéliales et de cellules de type mésenchymateux |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | HTR-8/SVneo (numéro de catalogue Cytion 305221) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 9606 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_7162 |
| Statut OGM | GMO-S1 : Cette lignée cellulaire trophoblastique humaine (HTR-8/SVneo) contient un construct de l’antigène T du SV40 introduit par transfection, permettant l’immortalisation de cellules trophoblastiques primaires. L’insert est intégré de manière stable. Cette classification ne s’applique qu’en Allemagne et peut varier ailleurs. |
Données biomoléculaires
| Virus | Virus simien 40 (transfecté avec le plasmide pSV3neo contenant la région précoce du SV40) |
|---|
Manipulation
| Milieu de culture | RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 305221-170925 | Certificat d'analyse | 05. Dec. 2025 | 305221 |