Cellules HROC348Met

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 104,00 CAD$*

Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10^⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10^⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

cryovial

Numéro de produit : 300871

Fiche signalétique

Fiche de produit

Description	HROC348Met est une lignée cellulaire de carcinome colorectal humain issue d’une métastase hépatique métachrone d’un adénocarcinome colorectal réséqué chez un patient adulte, provenant de la collection modèle HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer). La plateforme HROC a été mise au point grâce à un processus normalisé de biobanque et de modélisation tumorale intégrant l’annotation clinique, la caractérisation moléculaire, les xénogreffes dérivées de patients (PDX) et les cultures in vitro correspondantes. HROC348Met représente l’un des modèles métastatiques dérivés de tissus de cancer colorectal réséqués chirurgicalement et a été établie dans des conditions de faible nombre de passages afin de préserver les caractéristiques biologiques spécifiques à la tumeur. Au sein de la collection HROC, les échantillons métastatiques – en particulier les métastases hépatiques – ont démontré une grande efficacité de prise de greffe chez les souris immunodéficientes, avec un taux global de prise de greffe des PDX d’environ 68 % dans l’ensemble de la cohorte, et un taux de réussite encore plus élevé pour les tumeurs métastatiques que pour les tumeurs primaires. Des analyses multivariées ont identifié l’atteinte ganglionnaire et les mutations activatrices dans les gènes KRAS et BRAF comme des prédicteurs indépendants de la réussite de l’établissement du modèle. La collection englobe tous les principaux sous-types moléculaires du carcinome colorectal, y compris l’instabilité chromosomique (CIN), le phénotype de méthylation des îlots CpG (CIMP), les tumeurs à microsatellites stables (MSS) et celles à instabilité élevée des microsatellites (MSI-H), garantissant ainsi la représentativité moléculaire de la maladie à un stade avancé. Le modèle HROC348Met a été établi dans ce cadre rigoureusement caractérisé, avec une annotation clinico-pathologique et moléculaire conforme à des protocoles normalisés. En tant que modèle de carcinome colorectal dérivé de métastases et à faible nombre de passages, HROC348Met convient à l’étude de la biologie des tumeurs métastatiques, des corrélations génotype-phénotype et à l’évaluation de la réponse thérapeutique, tant en culture 2D que dans des modèles PDX in vivo. L’approche de biobanque intégrée qui sous-tend sa création garantit la disponibilité de données cliniques appariées et, le cas échéant, de matériel de xénogreffe correspondant, ce qui permet de mener des études translationnelles en oncologie de précision et de prédire la réponse aux médicaments.
Organisme	Humain
Tissu	Métastases hépatiques
Maladie	Adénocarcinome
Site métastatique	Foie

Âge	77 ans
Genre	Homme
Origine ethnique	caucasien
Propriétés de croissance	Adepte

Référence	HROC348Met (numéro de catalogue Cytion 300871)
Niveau de biosécurité	1
NCBI_Numéro d'identification fiscale	9606
Cellosaurus - Numéro d'enregistrement	CVCL_1U99

État du MSI	MSS

Milieu de culture	DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
Suppléments	Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Réactif de dissociation	Accutase
Repiquage	Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides	Tous les 3 à 5 jours
Milieu de congélation	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Décongélation et culture des cellules	Assurez-vous que le flacon reste bien congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche afin de maintenir des températures optimales pendant le transport. À la réception, conservez immédiatement le cryofiole à une température inférieure à -150 °C pour garantir la préservation de l’intégrité cellulaire, ou passez à l’étape 3 si une culture immédiate est nécessaire. Pour une culture immédiate, décongelez rapidement le flacon en l’immergeant dans un bain-marie à 37 °C contenant de l’eau propre et un agent antimicrobien, en agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace. Effectuez toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux laminaire, en désinfectant le cryotube avec de l’éthanol à 70 % avant de l’ouvrir. Ouvrez avec précaution le flacon désinfecté et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant délicatement. Centrifuger le mélange à 300 x g pendant 3 minutes pour séparer les cellules, puis jeter avec précaution le surnageant contenant le milieu de congélation résiduel. Remettre délicatement le culot cellulaire en suspension dans 10 ml de milieu de culture frais. Pour les cellules adhérentes, répartir la suspension dans deux flacons de culture T25; pour les cultures en suspension, transférer la totalité du milieu dans un seul flacon T25 afin de favoriser une interaction et une croissance cellulaires efficaces. Respectez les protocoles de sous-culture établis pour assurer la croissance continue et le maintien de la lignée cellulaire, garantissant ainsi des résultats expérimentaux fiables.
Atmosphère d'incubation	37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'entreposage	Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Stérilité	La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Cellules HROC348Met

Renseignements généraux

Caractéristiques

Données réglementaires

Données biomoléculaires

Manipulation

Contrôle de la qualité et analyse moléculaire