Cellules HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 104,00 CAD$*

Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10^⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10^⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

cryovial

Numéro de produit : 300270

Fiche signalétique

Fiche de produit

Description	La lignée cellulaire HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, dérivée de cellules HeLa Kyoto, est un modèle spécialisé utilisé dans la recherche en biologie cellulaire. Elle a été génétiquement modifiée pour exprimer la kinase Aurora B (AURKB) marquée par la protéine fluorescente verte améliorée monomérique (mEGFP) et la protéine du centromère interne (INCENP) marquée par la protéine mCherry. Ces modifications permettent aux chercheurs de suivre la dynamique et les interactions de ces protéines au cours de la division cellulaire. La kinase Aurora B est essentielle à la ségrégation chromosomique et à la cytokinèse, tandis que l’INCENP est un composant essentiel du complexe passager chromosomique (CPC), qui coordonne la progression mitotique. Ce double marquage fluorescent constitue un outil puissant pour l’imagerie de cellules vivantes, permettant une étude détaillée de la distribution des protéines au cours du cycle cellulaire. La lignée cellulaire HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry est précieuse pour la recherche sur la régulation mitotique, la stabilité chromosomique et le point de contrôle mitotique. La précision des nucléases à doigt de zinc (ZFN) utilisées pour les modifications génétiques garantit l’exactitude de ce modèle, ce qui le rend idéal pour des études de haute fidélité en biologie du cancer et en développement thérapeutique.
Organisme	Humain
Tissu	Endocervix
Maladie	Adénocarcinome
Site métastatique	Site de la tumeur primaire (endocervix)
Applications	Biologie du complexe chromosomique passager (CPC); dynamique de la kinase Aurora B et de l’INCENP; imagerie de la mitose en cellules vivantes; suivi par fluorescence bicolore; ségrégation chromosomique; cytokinèse; point de contrôle mitotique; validation de l’édition génomique par ZFN
Synonymes	HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry

Âge	30 ans
Genre	Femme
Origine ethnique	Afro-Américain
Morphologie	Cellules de type épithélial présentant une forme de pierre en mosaïque
Type de cellule	Cellules épithéliales
Propriétés de croissance	Adepte

Référence	HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (numéro de catalogue Cytion 300270)
Niveau de biosécurité	1
NCBI_Numéro d'identification fiscale	9606
Cellosaurus - Numéro d'enregistrement	CVCL_VL14
Déposant	Le laboratoire Ellenberg (EMBL)
Statut OGM	GMO-S1 : Cette lignée HeLa Kyoto bicolore contient des constructions AURKB-mEGFP et INCENP-mCherry modifiées par ZFN, destinées à l’étude des complexes chromosomiques passagers. Cette classification ne s’applique qu’en Allemagne et peut varier ailleurs.

Produits	EGFP (protéine fluorescente verte améliorée)

Milieu de culture	DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Suppléments	Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Réactif de dissociation	Accutase
Repiquage	Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides	2 à 3 fois par semaine
Milieu de congélation	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Décongélation et culture des cellules	Assurez-vous que le flacon reste bien congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche afin de maintenir des températures optimales pendant le transport. À la réception, conservez immédiatement le cryofiole à une température inférieure à -150 °C pour garantir la préservation de l’intégrité cellulaire, ou passez à l’étape 3 si une culture immédiate est nécessaire. Pour une culture immédiate, décongelez rapidement le flacon en l’immergeant dans un bain-marie à 37 °C contenant de l’eau propre et un agent antimicrobien, en agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace. Effectuez toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux laminaire, en désinfectant le cryotube avec de l’éthanol à 70 % avant de l’ouvrir. Ouvrez avec précaution le flacon désinfecté et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant délicatement. Centrifuger le mélange à 300 x g pendant 3 minutes pour séparer les cellules, puis jeter avec précaution le surnageant contenant le milieu de congélation résiduel. Remettre délicatement le culot cellulaire en suspension dans 10 ml de milieu de culture frais. Pour les cellules adhérentes, répartir la suspension dans deux flacons de culture T25; pour les cultures en suspension, transférer la totalité du milieu dans un seul flacon T25 afin de favoriser une interaction et une croissance cellulaires efficaces. Respectez les protocoles de sous-culture établis pour assurer la croissance continue et le maintien de la lignée cellulaire, garantissant ainsi des résultats expérimentaux fiables.
Atmosphère d'incubation	37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'entreposage	Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Stérilité	La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Cellules HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry

Renseignements généraux

Caractéristiques

Données réglementaires

Données biomoléculaires

Manipulation

Contrôle de la qualité et analyse moléculaire