Cellules HCC827-Luc
1 104,00 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | HCC827-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine HCC827 d’adénocarcinome pulmonaire, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur de luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale HCC827 a été établie à partir d’un adénocarcinome pulmonaire et se distingue par la présence d’une délétion activatrice de l’exon 19 de l’EGFR (del E746-A750), qui lui confère une grande sensibilité aux inhibiteurs de la tyrosine kinase de l’EGFR (ITK) tels que le géfitinib, l’erlotinib et l’osimertinib. La lignée HCC827 est donc l’un des modèles précliniques les plus largement utilisés pour étudier la biologie du cancer du poumon induit par l’EGFR, les mécanismes de résistance acquise aux ITK et l’efficacité des thérapies ciblées de nouvelle génération. L’intégration stable de la luciférase dans la lignée HCC827-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et quantitative de la charge tumorale dans des modèles de tumeurs pulmonaires xénogreffées et orthotopiques chez des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal non invasif de la prise de greffe tumorale, de la cinétique de croissance, de la dissémination métastatique et de la réponse thérapeutique. Cela rend la lignée HCC827-Luc particulièrement adaptée à l’évaluation de l’efficacité des agents ciblant l’EGFR, des thérapies combinées et des stratégies de renversement de la résistance dans des contextes précliniques in vivo. La lignée HCC827-Luc conserve les principales caractéristiques moléculaires et phénotypiques de la lignée parentale HCC827, notamment la présence d’une délétion de l’exon 19 de l’EGFR et la sensibilité aux inhibiteurs de l’EGFR approuvés. La modification par la luciférase améliore considérablement la sensibilité et le débit des expériences, permettant des évaluations pharmacodynamiques en temps réel et facilitant à la fois le criblage à haut débit de médicaments et les études mécanistiques de la biologie de la voie de l’EGFR. Les chercheurs doivent vérifier l’activité de la luciférase, le statut de mutation de l’EGFR et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation dans le cadre d’études d’imagerie quantitative ou pharmacologiques. |
|---|---|
| Organisme | Humain |
| Tissu | Poumon |
| Maladie | Adénocarcinome pulmonaire |
Caractéristiques
| Âge | 39 ans |
|---|---|
| Genre | Femme |
| Origine ethnique | asiatique |
| Morphologie | Épithélial |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | HCC827-Luc (numéro de catalogue Cytion 305670) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 9606 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_2063 |
| Statut OGM | GMO-S1 : Cette lignée cellulaire contient une cassette de rapporteur à base de luciférase de luciole (Luc2, optimisée au niveau des codons) intégrée de manière stable, introduite par transduction lentivirale à réplication incompétente. La population cellulaire polyclonale ainsi obtenue a été maintenue sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Un confinement de niveau S1 est requis. Cette classification s’applique uniquement en Allemagne et peut varier ailleurs. |
Données biomoléculaires
| Expression de l'antigène | Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons) |
|---|
Manipulation
| Milieu de culture | RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase : 10 minutes à 37 °C |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Rapport de fractionnement | 1 à 3 |
| Densité de semis | de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm² |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 305670-110526 | Certificat d'analyse | 03. Jul. 2026 | 305670 |