Cellules DI TNC1
759,00 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | La lignée cellulaire DI TNC1 est un modèle d’astrocytes immortalisés dérivé d’astrocytes primaires de type 1 prélevés dans le diencéphale d’un rat nouveau-né. Les cellules ont été immortalisées à l’aide de l’antigène T intermédiaire du polyomavirus, ce qui leur confère la capacité de proliférer indéfiniment tout en conservant plusieurs caractéristiques des astrocytes primaires. Les cellules DI TNC1 sont largement utilisées dans les études sur la neuroinflammation et la neuroprotection, notamment pour étudier le métabolisme énergétique des astrocytes, leur réponse au stress oxydatif et la régulation des voies inflammatoires. Ces cellules expriment des marqueurs astrocytaires clés, tels que la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP) et la protéine S100β, et participent à des processus métaboliques, notamment le stockage du glycogène et l’apport énergétique aux neurones. L’une des caractéristiques distinctives des astrocytes DI TNC1 réside dans leur rôle dans les études sur le métabolisme énergétique. Des recherches ont démontré que ces cellules réagissent à divers neurotransmetteurs, tels que la noradrénaline et le peptide intestinal vasoactif (VIP), en subissant une glycogénolyse et en modulant les niveaux d’AMP cyclique (AMPc). De plus, il a été démontré que les cellules DI TNC1 utilisent le glucose et produisent du lactate, deux éléments essentiels au maintien des fonctions neuronales. Cependant, certaines réponses observées chez les astrocytes primaires, comme la glycolyse stimulée par le glutamate ou une resynthèse significative du glycogène à long terme, ne sont pas aussi marquées chez les cellules DI TNC1. Cela souligne l’utilité des cellules DI TNC1 pour analyser des aspects spécifiques de la physiologie des astrocytes qui sont pertinents pour la dynamique énergétique du système nerveux central. Un autre domaine de recherche important utilisant les cellules DI TNC1 concerne l’étude du stress oxydatif et des voies de signalisation inflammatoires. Par exemple, les cellules DI TNC1 ont été utilisées pour analyser la régulation des voies du facteur nucléaire kappa-chaîne légère-activateur des cellules B activées (NF-κB) et du facteur nucléaire 2 lié à l’érythroïde (Nrf2). Des expériences menées avec des polyphénols végétaux comme la quercétine et des extraits de plantes telles que l’ashwagandha ont montré que ces composés peuvent moduler les voies NF-κB et Nrf2/ARE (élément de réponse antioxydante) dans les astrocytes DI TNC1. Plus précisément, on a constaté que la quercétine inhibe l’activité de NF-κB induite par le lipopolysaccharide (LPS) et renforce les défenses antioxydantes médiées par Nrf2, ce qui illustre le potentiel de ces cellules pour le criblage d’agents anti-inflammatoires et neuroprotecteurs. |
|---|---|
| Organisme | Rat |
| Tissu | Cerveau, diencéphale |
| Maladie | Normal |
| Synonymes | DITNC1, DI-TNC1, DI TNC-1 |
Caractéristiques
| Race/Sous-espèce | Sprague Dawley |
|---|---|
| Âge | 1 jour |
| Genre | Non précisé |
| Morphologie | Fibroblaste |
| Type de cellule | Astrocyte de type II |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | DI TNC1 (numéro de catalogue Cytion 305343) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 2 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10116 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_0247 |
| Statut OGM | GMO-S1 : Cette lignée cellulaire d’astrocytes de rat (DI TNC1) contient un construct de la région précoce du gène SV40 sous le contrôle du promoteur GFAP, introduit par transfection plasmidique, ce qui permet l’immortalisation. L’insert est stable dans les cellules dérivées d’astrocytes primaires. Cette classification ne s’applique qu’en Allemagne et peut varier ailleurs. |
Données biomoléculaires
| Expression des protéines | Gènes exprimés : alpha-2-macroglobuline, transferrine |
|---|---|
| Tumorigène | Non, testé chez des souris immunodéprimées, mais a formé des colonies dans un milieu semi-solide |
| Virus | Transformant : virus simien 40 (SV40) |
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 305343-130924 | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 305343 |