Cellules CHO-BCMA
Renseignements généraux
| Description | Avertissement : Les prix indiqués pour les lignées cellulaires s’adressent exclusivement aux clients du milieu universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d’environ 6 250 €. CHO-BCMA est une lignée cellulaire stable recombinante dérivée d’ovaires de hamster chinois (CHO), conçue pour exprimer l’antigène de maturation des cellules B humaines (BCMA; TNFRSF17/CD269) dans sa forme intégrale. La lignée cellulaire a été générée à l’aide d’un système de recombinaison par « landing pad » spécifique à un site, qui permet une intégration génomique reproductible et une expression stable de la cible. Le BCMA est un récepteur transmembranaire exprimé principalement sur les cellules B matures et les plasmocytes, où il régule la survie et la prolifération cellulaires par interaction avec les ligands BAFF et APRIL. Ce récepteur joue un rôle crucial dans le myélome multiple et d’autres tumeurs malignes à cellules B, ce qui rend les cellules CHO-BCMA utiles pour le criblage d’anticorps thérapeutiques, le développement de thérapies CAR-T et d’engagers bispécifiques de cellules T, les études de liaison aux récepteurs, ainsi que le développement de tests basés sur la cytométrie en flux. |
|---|---|
| Organisme | Hamster chinois |
| Tissu | Ovaire |
| Maladie | Ovaires de hamster chinois, non néoplasiques; modifiés génétiquement pour l'expression de la protéine BCMA (CD269/TNFRSF17) à la surface cellulaire |
| Applications | Dépistage d’anticorps; développement de traitements ciblant le BCMA; validation des cellules CAR-T; recherche sur le myélome multiple; cytométrie en flux |
Caractéristiques
| Morphologie | De type épithélial |
|---|---|
| Type de cellule | Cellules épithéliales |
| Propriétés de croissance | Adhérent/en suspension |
Données réglementaires
| Référence | CHO-BCMA (numéro de catalogue Cytion 305972) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10029 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_A8V3 |
| Statut OGM | GMO-S1 : Cette lignée cellulaire CHO contient une cassette d’expression du gène BCMA permettant d’effectuer des analyses de la fonction du récepteur. Cette classification ne s’applique qu’en Allemagne et peut varier dans d’autres pays. |
Données biomoléculaires
| Récepteurs exprimés | BCMA, TNFRSF17/CD269 |
|---|
Manipulation
| Milieu de culture | Pour les cultures adhérentes : DMEM : Ham’s F12 (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a) Pour les cultures en suspension : milieu de croissance CHO A (de InSCREENeX; numéro de catalogue InSCREENeX INS-ME-1039) |
|---|---|
| Suppléments | Pour les cultures adhérentes : compléter le milieu avec 5 % de FBS. Ajouter du Geneticin (G418-Sulfat) afin d’obtenir une concentration finale de 0,5 mg/mL. |
| Réactif de dissociation | Pour les cultures adhérentes : trypsine-EDTA |
| Temps de doublement | environ 14 à 16 heures |
| Repiquage | Pour une culture cellulaire adhérente de routine : Aspirez l’ancien milieu de culture des cellules adhérentes, puis lavez-les avec du PBS afin d’éliminer tout résidu de milieu. Après avoir aspiré le PBS, ajoutez le volume approprié de solution de trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (p. ex., 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75) et incubez à température ambiante ou à 37 °C pendant 5 à 10 minutes, ou jusqu’à ce que les cellules se détachent. Surveillez le détachement au microscope et tapotez doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajoutez du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettez délicatement les cellules en suspension, puis transférez une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placez le récipient dans un incubateur réglé à 37 °C avec 5 % de CO₂, et changez le milieu tous les 2 à 3 jours. |
| Rapport de fractionnement | On recommande un rapport de 1:5 à 1:10 |
| Densité de semis | de 2 à 4 × 10⁵ cellules/mL |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |