Cellules CDNR4
1 104,00 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | La lignée cellulaire CDNR4 comprend un sous-ensemble spécialisé issu de la lignée cellulaire COMMA-D, connue pour servir de modèle au carcinome mammaire chez la souris. Cette sous-population clonale a fait l’objet d’une caractérisation approfondie, qui a mis en évidence toute une série de propriétés et de fonctionnalités uniques. L’une des caractéristiques les plus frappantes des cellules CDNR4 est leur ressemblance avec les cellules souches mammaires, ce qui en fait une ressource importante pour l’étude de divers aspects de la biologie des cellules souches, de la carcinogenèse et de l’hétérogénéité cellulaire au sein des populations. Ces cellules ont été développées par la transfection d’un transposon portant des gènes de résistance à la kanamycine et à la néomycine (gène Tn5), ce qui a conduit à l’émergence de divers traits et capacités intrigants, notamment leur potentiel à se différencier en phénotypes tant prénéoplasiques que néoplasiques. Issu de la lignée COMMA-D, qui a d’abord fait l’objet d’études sur son hétérogénéité cellulaire à l’aide de diverses techniques telles que la microscopie à contraste de phase, la coloration immunocytochimique, l’analyse de la teneur en ADN et l’évaluation du potentiel oncogénique, le CDNR4 se distingue comme un clone distinct. Grâce à des méthodes spécifiques de transfection et de sélection, des sous-populations clonales telles que CDNR4 ont été isolées, chacune conservant un certain degré de l’hétérogénéité observée dans les cellules parentales COMMA-D d’origine. Cette conservation de l’hétérogénéité souligne la nature complexe de ces populations cellulaires et renforce la valeur des cellules CDNR4 dans la recherche axée sur la différenciation cellulaire et la progression du cancer. |
|---|---|
| Organisme | Souris |
| Tissu | Sein |
| Maladie | Adénocarcinome |
Caractéristiques
| Âge | 1 an |
|---|---|
| Genre | Femme |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | CDNR4 (numéro de catalogue Cytion 400391) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10090 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_5719 |
Données biomoléculaires
Manipulation
| Milieu de culture | DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Densité de semis | Il est recommandé d'utiliser 2 × 10⁴ cellules/cm² |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Rétablissement après le dégel | Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures. |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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