Cellules BEWO
545,10 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Renseignements généraux
| Description | Les cellules BeWo, une lignée cellulaire dérivée d’un choriocarcinome gestationnel malin du placenta fœtal masculin, sont devenues un modèle in vitro largement utilisé pour l’étude du placenta. La fusion intercellulaire qui se produit pendant la phase de syncytialisation des trophoblastes humains au cours du développement placentaire est l’un des événements les plus importants, mais aussi l’un des moins bien compris. En raison de la difficulté à étudier ce processus dans un placenta in vivo, les cellules BeWo sont utilisées comme modèle de culture cellulaire pour simuler la syncytialisation in vivo des trophoblastes villositaires placentaires. Ces cellules présentent un phénotype de type épithélial et sont adhérentes. Le sous-clone b30 des cellules BeWo est particulièrement utile pour étudier l’absorption et le transport des nutriments en raison de sa croissance dense sur des membranes perméables. La CK 7 et l’E-cadhérine sont des marqueurs moléculaires exprimés par les cellules BeWo. La VE-cadhérine est présente dans les cellules BeWo et son expression est renforcée par un traitement à la forskoline. Les cellules expriment également la kératine et sont positives pour l’isoenzyme B de la G6PD. Le caryotype des cellules BeWo présente un nombre modal de 86, avec une fourchette allant de 71 à 178, et le nombre de la lignée souche est hypotétraploïde. Le caryotype est relativement stable au sein de ce nombre de la lignée souche. Les cellules BeWo sécrètent diverses hormones, notamment la gonadotrophine chorionique humaine (hCG), la somatomammotropine chorionique humaine (lactogène placentaire) et des hormones stéroïdes telles que l’estrone, l’estriol et l’estradiol. Cependant, les concentrations de β-hCG et d’estradiol sécrétées par les cellules BeWo sont inférieures à celles sécrétées par d’autres lignées cellulaires dérivées du choriocarcinome, telles que la lignée JEG-3. Après un traitement à la forskoline, la sécrétion de β-hCG par les cellules BeWo augmente pour atteindre un niveau similaire à celui observé dans les autres lignées cellulaires dérivées du choriocarcinome. De plus, le traitement à la forskoline augmente également les concentrations de progestérone sécrétées par les cellules BeWo. En résumé, les cellules BeWo constituent un modèle in vitro largement utilisé pour l’étude du développement placentaire et du processus de syncytialisation des trophoblastes humains. Elles présentent un phénotype de type épithélial, expriment divers marqueurs moléculaires et sécrètent plusieurs hormones, notamment l’hCG, le lactogène placentaire et des hormones stéroïdes. Dans l’ensemble, les cellules BeWo constituent un outil précieux pour l’étude des processus complexes impliqués dans le développement placentaire. |
|---|---|
| Organisme | Humain |
| Tissu | Placenta |
| Maladie | Choriocarcinome |
| Site métastatique | Cerveau |
| Synonymes | BeWo, Be Wo, Be-Wo |
Caractéristiques
| Âge | Fœtus |
|---|---|
| Genre | Homme |
| Morphologie | De type épithélial |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Données réglementaires
| Référence | BEWO (numéro de catalogue Cytion 300123) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 9606 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_0044 |
Données biomoléculaires
| Isoenzymes | G6PD, B |
|---|---|
| Sensibilité aux virus | Poliovirus 3, stomatite vésiculeuse (Indiana) |
| Transcriptase inverse | Négatif |
| Produits | Progestérone, somatomammotropine chorionique humaine (lactogène placentaire), œstrogène, estrone, estriol, estradiol, kératine |
Manipulation
| Milieu de culture | Milieu F12K de Ham, contenant : 2,0 mM de L-glutamine, 2,0 mM de pyruvate de sodium, 2,5 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820608a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Densité de semis | Il est recommandé d'utiliser une densité d'ensemencement de 1 × 10⁴ cellules/cm². |
| Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
| Rétablissement après le dégel | Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures. |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
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| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôle de la qualité et analyse moléculaire
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 300123-1022 | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 300123 |
| 300123-010425 | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 300123 |