Cellules B-LCL-HROG02

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 072,26 CAD$*

Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10^⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10^⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

cryovial

Numéro de produit : 302106

Fiche signalétique

Fiche de produit

Description	La lignée cellulaire B-LCL-HROG02 est une lignée de cellules lymphoblastoïdes B humaines transformées par le virus d’Epstein-Barr (EBV) (B-LCL) établie à partir du sang périphérique d’un patient de sexe masculin de type caucasien âgé de 68 ans atteint d’un cancer de l’estomac, dans le cadre de la série de la biobanque HROG, qui correspond à la collection de B-LCL de cancer de l’estomac de la collection HROC de cancer colorectal. L’immortalisation in vitro des lymphocytes B primaires du sang périphérique, induite par l’EBV, a permis d’obtenir une lignée cellulaire en suspension à prolifération stable, présentant une morphologie de type lymphoblaste. Les cellules HROG02 expriment de manière constitutive les antigènes de latence de l’EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) ainsi que des niveaux élevés de molécules HLA de classe I et II, des molécules co-stimulatrices CD80 et CD86, des molécules d’adhésion CD54 et CD58, et des marqueurs des cellules B CD19, CD20 et CD23. La lignée B-LCL-HROG02 est utilisée dans les tests fonctionnels des cellules T et des cellules NK, le typage HLA, les réactions lymphocytaires mixtes, les études sur la présentation des antigènes et les protocoles d’induction des lymphocytes T cytotoxiques (CTL). Au sein de la biobanque HROG appariée aux patients, elle constitue une référence immunologique définie pour la recherche sur le cancer de l’estomac, permettant des études autologues ou allogéniques sur les réponses immunitaires associées à la tumeur. Cette lignée soutient les recherches sur la réactivité des cellules T spécifiques au cancer de l’estomac ainsi que les systèmes de tests immunologiques appariés aux patients, pertinents pour l’immunologie des tumeurs gastriques. La lignée B-LCL-HROG02 est cultivée en suspension dans du RPMI 1640 enrichi de 15 à 20 % de sérum fœtal bovin (FBS) à 37 °C dans une atmosphère humidifiée contenant 5 % de CO₂. Les cellules sont repiquées tous les 2 à 3 jours par dilution à une concentration de 2 à 5 × 10⁵ cellules/mL. Aucune dissociation enzymatique n’est requise. Tous les travaux menés avec cette lignée cellulaire positive pour l’EBV doivent respecter les exigences de confinement de biosécurité de niveau BSL-2 ainsi que les règlements institutionnels et nationaux applicables régissant le matériel biologique transformé par l’EBV.
Organisme	Humain
Tissu	Sang périphérique
Maladie	Lignée cellulaire lymphoblastoïde B transformée par l’EBV (B-LCL); donneur atteint d’un cancer de l’estomac
Applications	Recherche en immunologie; tests sur les cellules T et les cellules NK; typage HLA; études sur la présentation des antigènes; réactions lymphocytaires mixtes; cellules cibles pour les tests CTL; immunologie du cancer de l'estomac

Âge	68 ans
Genre	Homme
Origine ethnique	caucasien
Morphologie	De type lymphoblaste
Type de cellule	Lymphoblaste B
Propriétés de croissance	Suspension

Référence	B-LCL-HROG02 (numéro de catalogue Cytion 302106)
Niveau de biosécurité	2
NCBI_Numéro d'identification fiscale	9606
Statut OGM	GMO-S2 : Cette lignée cellulaire B (B-LCL) contient un épisome de l’EBV maintenu de façon stable, codant pour des gènes de la phase latente virale (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). L’EBV est classé parmi les agents pathogènes du groupe de risque 2. Sa manipulation nécessite un niveau de confinement BSL-2. Cette classification s’applique en Allemagne; la réglementation peut varier dans d’autres pays.

Virus	Transformant : EBV

Milieu de culture	RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Suppléments	Ajouter 15 à 20 % de FBS au milieu de culture
Temps de doublement	de 24 à 48 heures
Repiquage	Diluez la culture à une concentration de 2 à 5 × 10⁵ cellules/ml avec du milieu complet frais et préchauffé tous les 2 à 3 jours. Comptez les cellules viables avant le repiquage afin de maintenir une densité optimale. Ne laissez pas les cultures dépasser 2 × 10⁶ cellules/ml. Une centrifugation (300 × g, 5 min) peut être effectuée pour renouveler le milieu au besoin. Aucune dissociation enzymatique n’est requise.
Rapport de fractionnement	1 à 4
Densité de semis	de 2 à 5 × 10⁵ cellules/ml
Renouvellement des fluides	Tous les 2 ou 3 jours
Milieu de congélation	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Décongélation et culture des cellules	Assurez-vous que le flacon reste bien congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche afin de maintenir des températures optimales pendant le transport. À la réception, conservez immédiatement le cryofiole à une température inférieure à -150 °C pour garantir la préservation de l’intégrité cellulaire, ou passez à l’étape 3 si une culture immédiate est nécessaire. Pour une culture immédiate, décongelez rapidement le flacon en l’immergeant dans un bain-marie à 37 °C contenant de l’eau propre et un agent antimicrobien, en agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace. Effectuez toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux laminaire, en désinfectant le cryotube avec de l’éthanol à 70 % avant de l’ouvrir. Ouvrez avec précaution le flacon désinfecté et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant délicatement. Centrifuger le mélange à 200 x g pendant 5 minutes, puis jeter avec précaution le surnageant contenant le milieu de congélation. Suivre la procédure décrite dans la section « Récupération après décongélation ».
Atmosphère d'incubation	37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'entreposage	Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Cellules B-LCL-HROG02

Renseignements généraux

Caractéristiques

Données réglementaires

Données biomoléculaires

Manipulation

Contrôle de la qualité et analyse moléculaire