Cellules 3T3-L1
545,10 CAD$*
Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).
Points clés concernant la lignée cellulaire 3T3-L1
| Description | Les cellules 3T3-L1 constituent une lignée clonale de préadipocytes dérivés de fibroblastes embryonnaires de souris. Ces cellules sont devenues un modèle in vitro largement utilisé pour l’étude du processus d’adipogenèse, notamment l’adipogenèse et la lipogenèse, c’est-à-dire la différenciation des préadipocytes en adipocytes (cellules adipeuses). Le nom « 3T3 » fait référence au protocole de transfert (T) qui consistait à transférer les cellules tous les 3 jours, et « L1 » désigne le clone particulier qui a été isolé. Au départ, les cellules 3T3-L1 présentent une morphologie de type fibroblastique, mais lors de l’induction de leur différenciation, elles passent d’un état de préadipocytes à celui d’adipocytes matures et accumulent des gouttelettes lipidiques, une caractéristique distinctive de l’obésité et du syndrome métabolique. Le processus de différenciation des préadipocytes 3T3-L1 en adipocytes 3T3-L1 est déclenché par un cocktail spécifique d’inducteurs, comprenant généralement de la dexaméthasone, de la 3-isobutyl-1-méthylxanthine (IBMX) et de l’insuline. À mesure que les adipocytes 3T3-L1 acquièrent les caractéristiques des adipocytes matures, ils commencent à exprimer des gènes essentiels au fonctionnement des adipocytes, tels que ceux codant pour des enzymes impliquées dans le métabolisme des acides gras et des hormones comme la leptine et l’adiponectine, qui jouent un rôle vital dans la régulation de l’appétit, du bilan énergétique et de la sensibilité à l’insuline. L’étude des transformations des cellules 3T3-L1 permet de mieux comprendre l’adipogenèse, l’obésité et les maladies liées à l’excès de graisse, comme le diabète de type 2, en mettant en lumière comment l’accumulation de lipides dans les adipocytes entraîne un dysfonctionnement cellulaire et des troubles métaboliques plus généraux. De plus, la lignée cellulaire 3T3-L1 est essentielle pour étudier l’impact de diverses substances sur le comportement des adipocytes, comme l’effet d’agents pharmacologiques sur la lipolyse ou les propriétés anti-inflammatoires de certains régimes alimentaires susceptibles de prévenir la résistance à l’insuline. Les cellules 3T3-L1 ont été largement utilisées pour étudier les mécanismes moléculaires et cellulaires sous-jacents à la différenciation des adipocytes, à la sensibilité à l’insuline, au métabolisme des lipides et aux effets de divers agents nutritionnels et pharmacologiques sur ces processus. Compte tenu de leur capacité à se différencier en adipocytes et de leur facilité de culture in vitro, les cellules 3T3-L1 constituent un système modèle précieux pour la recherche sur l’obésité et le diabète, ainsi que pour la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques liées aux maladies métaboliques. |
|---|---|
| Organisme | Souris |
| Tissu | Embryonnaire |
| Site métastatique | Sans objet (préadipocytes embryonnaires; non tumorigènes) |
| Applications | Les cellules 3T3-L1 ont été utilisées comme système modèle pour comprendre les mécanismes moléculaires qui régulent l’adipogenèse et le métabolisme lipidique, et ont fait l’objet de recherches liées à l’obésité, au diabète et aux maladies métaboliques. Elles constituent également un hôte viable pour la transfection. |
| Synonymes | 3T3 L1, 3T3L1, 3T3-L1 ad, NIH-3T3-L1, NIH3T3-L1 |
Aspects
| Race/Sous-espèce | Albinos suisses |
|---|---|
| Âge | Embryon |
| Genre | Homme |
| Morphologie | De type fibroblaste |
| Type de cellule | Préadipocyte / adipocyte (après différenciation) |
| Propriétés de croissance | Adepte |
Caractéristiques techniques
| Référence | 3T3-L1 (numéro de catalogue Cytion 400107) |
|---|---|
| Niveau de biosécurité | 1 |
| NCBI_Numéro d'identification fiscale | 10090 |
| Cellosaurus - Numéro d'enregistrement | CVCL_0123 |
| Statut OGM | Aucune modification génétique; la lignée 3T3-L1 est un sous-clone de la lignée NIH/3T3 sélectionné pour son potentiel de différenciation adipogénique; aucun transgène n’a été introduit |
Profil génétique de la lignée cellulaire 3T3-L1
| Tumorigène | Non |
|---|---|
| Sensibilité aux virus | Virus de la leucémie murine, virus du sarcome murin, stomatite vésiculeuse, virus de la vaccine, herpès simplex, oncornavirus N-tropiques C |
| Produits | Insuline, collagène, triglycérides |
| Statut de ploïdie | Aneuploïde |
| Caryotype | 2n = 40 |
Manipulation du 3T3-L1
| Milieu de culture | DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suppléments | Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture |
| Réactif de dissociation | Accutase |
| Repiquage | Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
| Rapport de fractionnement | 1 à 5 |
| Densité de semis | de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm² |
| Renouvellement des fluides | Tous les 2 ou 3 jours |
| Milieu de congélation | Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation. |
| Décongélation et culture des cellules |
|
| Atmosphère d'incubation | 37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée. |
| Conditions d'expédition | Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié. |
| Conditions d'entreposage | Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide. |
Contrôles de pureté et d’identité des cellules 3T3 L1
| Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes. |
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Certificat d'analyse (CoA)
| Numéro de lot | Type de certificat | Date | Numéro de catalogue |
|---|---|---|---|
| 400107-020523 | Certificat d'analyse | 23. May. 2025 | 400107 |
| 400107-060525 | Certificat d'analyse | 21. Jul. 2025 | 400107 |