A375-GFP

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 104,00 CAD$*

Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10^⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10^⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

cryovial

Numéro de produit : 305665

Fiche signalétique

Fiche de produit

Certificat d'analyse (CoA)

Description	La lignée A375-GFP est une variante génétiquement modifiée de la lignée cellulaire A375 de mélanome malin humain, qui exprime de manière stable la protéine fluorescente verte améliorée (eGFP). La lignée cellulaire parentale A375 est dérivée d’un mélanome cutané chez un patient adulte et est largement utilisée comme modèle de mélanome cutané, en particulier pour les études portant sur la voie de signalisation oncogénique BRAF, car elle porte la mutation BRAF V600E. Cette mutation entraîne une activation constitutive de la voie MAPK/ERK, favorisant la prolifération et la survie des cellules, ce qui rend les cellules A375 particulièrement pertinentes pour l’étude de thérapies ciblées telles que les inhibiteurs de BRAF et de MEK. La lignée dérivée exprimant la GFP conserve ces caractéristiques moléculaires et phénotypiques tout en permettant des applications basées sur la fluorescence. L’incorporation stable du rapporteur eGFP permet la visualisation en temps réel des cellules A375-GFP aussi bien dans des systèmes in vitro qu’in vivo. L’imagerie par fluorescence facilite le suivi de la prolifération, de la migration, de l’invasion et des changements morphologiques des cellules, ainsi que le suivi de la croissance tumorale et de la dissémination métastatique dans des modèles de xénogreffes. La variante améliorée de la GFP offre une luminosité et une stabilité accrues par rapport aux constructions GFP antérieures, permettant une détection sensible même à de faibles nombres de cellules. Cela rend la lignée A375-GFP particulièrement utile dans les expériences de co-culture, les plateformes d’imagerie à haut contenu et les études nécessitant une résolution spatiale précise du comportement des cellules tumorales. La lignée A375-GFP conserve le phénotype agressif et prolifératif de la lignée parentale de mélanome, y compris la réactivité aux inhibiteurs de la voie MAPK et la capacité d’invasion et de métastase dans les modèles expérimentaux. L’ajout de la GFP élargit son utilité pour le criblage de médicaments, l’imagerie de cellules vivantes et les études sur les interactions entre la tumeur et son microenvironnement. Comme pour les autres lignées cellulaires marquées par un rapporteur, il est recommandé de valider la stabilité et la cohérence de la fluorescence au fil des passages pour des applications expérimentales spécifiques. Modification génétique : Modifiée de façon stable par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer le rapporteur protéique fluorescent vert ZsGreen1; maintenue sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Confinement S1/BSL-1.
Organisme	Humain
Tissu	Jambe, peau
Maladie	Mélanome amélanotique

Âge	54 ans
Genre	Femme
Origine ethnique	caucasien
Propriétés de croissance	Adepte

Référence	A375-GFP (numéro de catalogue Cytion 305665)
Niveau de biosécurité	1
NCBI_Numéro d'identification fiscale	9606
Cellosaurus - Numéro d'enregistrement	CVCL_QZ67
Statut OGM	GMO-S1 : Cette lignée cellulaire contient un rapporteur à base de protéine fluorescente verte ZsGreen1 intégré de manière stable, introduit par transduction lentivirale à réplication incompétente. La population cellulaire polyclonale ainsi obtenue a été maintenue sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Un confinement de niveau S1 est requis. Cette classification s’applique uniquement en Allemagne et peut varier ailleurs.

Expression de l'antigène	ZsGreen1 (protéine fluorescente verte)
Profil mutationnel	Mutation : BRAF, simple, p.Val600Glu (c.1799T>A), homozygote (provenant de la lignée cellulaire parentale).Mutation, CDKN2A, simple, p.Glu61Ter (c.181G>T) (p.Gly75Val, c.224G>T), homozygote (provenant de la lignée cellulaire parente).Mutation, CDKN2A, simple, p.Glu69Ter (c.205G>T) (p.Gly83Val, c.248G>T), homozygote (provenant de la lignée cellulaire parente).Mutation, TERT, simple, c.1-146C>T (c.250C>T) (C250T), non précisée, remarque = dans le promoteur (provenant de la lignée cellulaire parentale).

Milieu de culture	DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Suppléments	Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Réactif de dissociation	Accutase
Repiquage	Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis	de 1 à 3 × 10^⁴ ^cellules/cm^²
Renouvellement des fluides	2 à 3 fois par semaine
Milieu de congélation	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Décongélation et culture des cellules	Assurez-vous que le flacon reste bien congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche afin de maintenir des températures optimales pendant le transport. À la réception, conservez immédiatement le cryofiole à une température inférieure à -150 °C pour garantir la préservation de l’intégrité cellulaire, ou passez à l’étape 3 si une culture immédiate est nécessaire. Pour une culture immédiate, décongelez rapidement le flacon en l’immergeant dans un bain-marie à 37 °C contenant de l’eau propre et un agent antimicrobien, en agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace. Effectuez toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux laminaire, en désinfectant le cryotube avec de l’éthanol à 70 % avant de l’ouvrir. Ouvrez avec précaution le flacon désinfecté et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant délicatement. Centrifuger le mélange à 200 x g pendant 5 minutes, puis jeter avec précaution le surnageant contenant le milieu de congélation. Suivre la procédure décrite dans la section « Récupération après décongélation ».
Atmosphère d'incubation	37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'entreposage	Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Numéro de lot	Type de certificat	Date	Numéro de catalogue
305665-200426	Certificat d'analyse	24. Jun. 2026	305665

A375-GFP

Renseignements généraux

Caractéristiques

Données réglementaires

Données biomoléculaires

Manipulation

Contrôle de la qualité et analyse moléculaire

Certificat d'analyse (CoA)