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Cellules U87MG – Recherche sur le glioblastome à l’aide de la lignée cellulaire U87MG et son impact sur les études sur le cancer du cerveau

La lignée cellulaire U-87 MG, issue d’un glioblastome primaire humain, est largement utilisée dans la recherche biologique. Ces cellules sont notamment employées dans les domaines des neurosciences et de l’immuno-oncologie.

📋 Lignée cellulaire U-87 MG — Faits en bref
Milieu de culture
La lignée cellulaire U-87 MG est cultivée dans du milieu EMEM (milieu essentiel minimal d’Eagle) enrichi de 1,0 g/L de L-glucose, 2,0 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1 % de NEAA, 1 mM de pyruvate de sodium et 10 % de FBS. Le milieu doit être renouvelé tous les 2 à 3 jours.
Temps de doublement
Les cellules U 87 MG ont un temps de doublement de la population compris entre 18 et 38 heures.
Type de croissance
U 87 MG est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules ont une forme allongée et se développent en monocouches.
Niveau de biosécurité
BSL-1
Disponible auprès de
Cytion — Commander U-87 MG

Caractéristiques générales et origine de la lignée cellulaire U-87 MG

Cette section passe en revue l’origine et les caractéristiques générales de la lignée cellulaire U-87. Vous apprendrez ce que sont les cellules U-87 MG, d’où proviennent les cellules U-87, ce que signifie l’abréviation U-87 MG, quelle est la taille des cellules U-87 et quelle est la morphologie de la lignée cellulaire U-87.

  • La lignée cellulaire U87 est une lignée de cellules de glioblastome, plus précisément d’astrocytome. Elle a été établie en 1966 à l’Université d’Uppsala. Les cellules ont été prélevées chez un homme de type caucasien âgé de 44 ans atteint d’un glioblastome. Cette lignée cellulaire est officiellement appelée U 87 MG, ce qui signifie « Uppsala 87 Malignant Glioma ».
  • Les cellules U 87 MG présentent une morphologie de type cellulaire épithéliale.
  • La taille des cellules U 87 MG varie entre 12 et 14 µm de diamètre.
  • Cette lignée cellulaire de glioblastome humain est hypodiploïde et présente un nombre modal de chromosomes de 44 chez environ 48 % de la population cellulaire. Toutefois, on observe également des ploidies plus élevées chez 5,9 % de la population cellulaire.

Animation médicale en 3D expliquant la formation des tumeurs à partir d’astrocytes.

Informations sur la culture des cellules U-87 MG

Avant de travailler avec des cellules U 87 MG, vous devez vous familiariser avec les points clés suivants concernant la culture de ces cellules de glioblastome. Vous devez notamment savoir : Quel est le temps de doublement de la population des cellules U 87 MG? Quel milieu utilise-t-on pour la culture des cellules U 87 MG? Quelle est la densité d’ensemencement de la lignée cellulaire U-87 MG?

Points clés pour la culture des cellules U-87 MG

Temps de doublement de la population :

Les cellules U 87 MG ont un temps de doublement de la population variant entre 18 et 38 heures.

Adhérentes ou en suspension :

La lignée cellulaire U-87 MG est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules ont une forme allongée et se développent en monocouches.

Densité d’ensemencement :

Il est recommandé d’ensemencer la lignée cellulaire de glioblastome U 87 MG à une densité de 1 × 10 cellules/cm². Les cellules U 87 adhérentes sont lavées avec du PBS 1×, puis incubées avec une solution d’Accutase. Par la suite, les cellules dissociées sont centrifugées et récupérées. Les cellules sont soigneusement remises en suspension et ajoutées dans de nouveaux flacons contenant du milieu de croissance.

Milieu de croissance :

La lignée cellulaire U 87 MG est cultivée dans du milieu EMEM (milieu essentiel minimal d’Eagle) enrichi de 1,0 g/L de L-glucose, 2,0 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, 1 % de NEAA, 1 mM de pyruvate de sodium et une solution à 10 % de sérum fœtal bovin (FBS). Le milieu doit être renouvelé tous les 2 à 3 jours.

Conditions de croissance :

Les cellules U-87 MG nécessitent un incubateur humidifié avec un apport de 5 % de CO₂ et une température de 37 °C pour une croissance optimale.

Conservation :

Les cellules U87 sont conservées soit en phase vapeur d’azote liquide, soit à une température inférieure à -150 °C afin de maintenir une viabilité maximale des cellules de glioblastome.

Procédure et milieu de congélation :

Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF conviennent à la congélation des cellules U 87 MG. Un processus de congélation lente est recommandé, car il évite tout choc aux cellules et préserve leur viabilité.

Procédure de décongélation :

Les flacons de la lignée cellulaire U-87 MG congelés sont décongelés dans un bain-marie à 37 °C. On ajoute un milieu de croissance aux cellules, on les remet en suspension, puis on les transfère dans de nouveaux flacons pour la culture. Par ailleurs, les cellules U87 peuvent être centrifugées pour éliminer le milieu de congélation, puis mises en culture.

Niveau de biosécurité :

Le niveau de biosécurité 1 est requis pour la manipulation des cultures cellulaires U-87 MG.

U87mg cells

Cellules U-87 MG observées au microscope avec des grossissements de 10x et 20x.

Avantages et inconvénients des cellules U-87 MG

Lorsque l’on pense à une lignée cellulaire, la première question qui vient à l’esprit est la suivante : quels sont les avantages liés à l’utilisation des cellules U-87 MG? Quels sont les inconvénients des cellules U-87?

Avantages

Les lignées cellulaires U-87 MG sont largement utilisées en recherche. Voici quelques-uns des avantages associés à cette lignée cellulaire :

Avantages

  • Faciles à cultiver : les cellules U-87 MG sont faciles à maintenir en culture. Elles ne nécessitent pas de conditions de culture particulièrement exigeantes ou compliquées.
  • Homogénéité : La lignée cellulaire U-87 MG est homogène. La plupart des cellules d’une population possèdent le même profil génétique et partagent donc des caractéristiques similaires. Ces cellules sont utilisées pour l’étude des processus cellulaires, le criblage de médicaments et les essais.
  • Bien caractérisée : Cette lignée cellulaire de glioblastome est bien caractérisée par ses caractéristiques de croissance, sa morphologie et son expression génique, ce qui en fait un outil de recherche précieux.

Inconvénients

  • Applicabilité limitée : La lignée cellulaire U-87 MG est une lignée de glioblastome; ses applications se limitent donc principalement à l’étude des glioblastomes et des mécanismes moléculaires sous-jacents. Elle pourrait ne pas convenir à l’étude d’autres types de cancer.

Applications de recherche utilisant les cellules U-87 MG

La lignée cellulaire de glioblastome U87MG est largement utilisée dans les études sur le cancer, en particulier dans la recherche sur le glioblastome. Voici quelques-unes des applications de recherche des cellules U 87 MG :

  • Recherche en biologie du cancer : La lignée cellulaire U-87 est utilisée pour étudier la croissance et le développement du cancer, les mécanismes moléculaires sous-jacents, les voies de signalisation et le microenvironnement tumoral. Une étude publiée en 2020 a utilisé un modèle in vitro de glioblastome, la lignée cellulaire U-87 MG, pour étudier le gène BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) en tant que cible thérapeutique. Les résultats ont montré que le gène BMAL1 inhibe la prolifération, la migration et l’invasion des cellules de glioblastome en supprimant l’expression des gènes de la cycline B1, de la métalloprotéinase-9 et de la phospho-AKT [1]. Une autre étude menée en 2019 a utilisé la lignée cellulaire U87 et a démontré que la régulation à la baisse de l’expression du facteur de transcription LITAF (facteur de nécrose tumorale alpha induit par les lipopolysaccharides) peut accroître la radiosensibilité des cellules de gliome par le biais d’une régulation à la hausse de la voie FOXO-1. Le LITAF est également connu sous le nom de gène 7 induit par p53 (PIG7) [2].
  • Découverte et développement de médicaments : les cellules U-87 MG peuvent être utilisées à des fins de criblage et d’essais de médicaments, ce qui permet aux chercheurs d’identifier de nouveaux médicaments anticancéreux potentiels et d’évaluer leur efficacité et leur toxicité. Une étude a utilisé la lignée cellulaire de glioblastome U-87 MG pour évaluer le potentiel anticancéreux et antioxydant de l’extrait d’Inula helenium (L.) [3]. De même, une autre publication a mentionné l’utilisation de la lignée cellulaire U-87 MG pour tester les effets cytotoxiques et apoptotiques d’extraits végétaux [4]. De plus, une étude publiée en 2018 a examiné l’effet cytotoxique d’alcaloïdes sesquiterpéniques extraits de plantes du genre Nuphar sur des lignées cellulaires U-87 MG sensibles et résistantes aux médicaments [5].

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Lignée cellulaire U-87 MG : Publications de recherche

Voici quelques publications de recherche marquantes portant sur la lignée cellulaire U-87 MG.

L’hypoxie favorise la migration et l’invasion des cellules U87 de glioblastome humain par l’intermédiaire de la voie PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α

Cet article, publié dans Neuroreport en 2018, suggère que l’hypoxie pourrait accroître la migration et l’invasion des cellules de glioblastome humain en régulant la voie de signalisation PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.

L’ériodictyol inhibe la prolifération et les métastases et induit l’apoptose des cellules de gliome par l’intermédiaire de la voie de signalisation PI3K/Akt/NF-κB

Cette étude a été publiée dans la revue *Frontiers in Pharmacology* en 2020. Les résultats de la recherche indiquent qu’un flavonoïde, l’ériodictyol, exerce des effets anticancéreux sur la lignée cellulaire U87 et inhibe la prolifération cellulaire et les métastases. Ce composé exerce ses propriétés antitumorales en modulant la voie PI3K/Akt/NF-κB.

La pilule Xihuang induit l’apoptose des cellules U-87 MG de glioblastome humain en ciblant la voie Akt/mTOR/FOXO1 médiée par les ROS

Cette étude publiée dans *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* (2018) suggère qu’une formule à base de plantes chinoises appelée « pilule Xihuang » peut induire l’apoptose des cellules U87 en ciblant la cascade Akt/mTOR/FOXO1 activée par les ROS.

Le LITAF augmente la radiosensibilité des cellules de gliome humain par l’intermédiaire de la voie FoxO1

Cet article de recherche a été publié dans la revue *Cellular and Molecular Neurobiology* en 2019. L’étude a proposé qu’un facteur de transcription, LITAF, régule à la baisse l’expression de FOXO-1 et augmente ainsi la radiosensibilité des cellules de gliome en régulant la voie de signalisation FOXO-1.

Préparation de nanoparticules de PLGA chargées de curcumine et étude de leurs effets cytotoxiques sur les cellules U87MG de glioblastome humain

Cet article a été publié dans Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Les chercheurs ont utilisé des cellules U87MG pour étudier l’effet cytotoxique des nanoparticules de PLGA chargées de curcumine.

Ressources sur les cellules U-87-MG : protocoles, vidéos et plus encore

La lignée cellulaire de glioblastome U87MG est utilisée dans de nombreux laboratoires de recherche sur le cancer. Voici quelques ressources consacrées à cette lignée cellulaire :

La ressource relative au protocole de culture cellulaire des cellules U87 est indiquée ci-dessous :

  • Cellules U87MG : Ce lien contient des renseignements de base sur la lignée cellulaire U87MG. Il comprend de brefs protocoles de division, de congélation et de décongélation des cellules.

Les lignées cellulaires de gliome, telles que les cellules de glioblastome U87, sont des cellules cultivées issues de gliomes humains, largement utilisées dans la recherche sur le cancer pour étudier la biologie des tumeurs, leur génétique et leur réponse aux médicaments. Elles servent de modèles pour comprendre le comportement des tumeurs et tester des stratégies thérapeutiques.

Une lignée cellulaire isogénique désigne des cellules issues d’une seule cellule, ce qui garantit leur uniformité génétique. Dans la recherche sur les gliomes, les lignées isogéniques constituent un modèle cohérent permettant d’étudier les modifications génétiques et leurs répercussions sur la croissance tumorale et la réponse aux traitements.

Le profil d'ADN des lignées cellulaires de gliomes est essentiel pour identifier les altérations génétiques, comprendre l'évolution des tumeurs et mettre au point des thérapies ciblées. Il facilite la classification des tumeurs en fonction de marqueurs génétiques tels que les mutations du gène IDH1.

Le sérum présent dans les milieux de culture cellulaire fournit aux cellules de gliome des facteurs de croissance, des hormones et des nutriments essentiels. Cependant, sa composition peut nuire à la reproductibilité des expériences, ce qui explique pourquoi on recourt de plus en plus à des milieux sans sérum ou à des milieux à teneur en sérum définie.

La cytotoxicité cellulaire dans les lignées cellulaires de gliomes est évaluée à l'aide de tests tels que la cytométrie en flux, qui permet de mesurer l'état de santé, la viabilité et la mort cellulaire après un traitement par des médicaments ou des cellules immunitaires, comme les cellules tueuses naturelles (NK).

La cytotoxicité des cellules NK joue un rôle essentiel dans la recherche sur le traitement des gliomes, car ces cellules sont capables de reconnaître et de détruire les cellules tumorales sans sensibilisation préalable. L’étude des interactions entre les cellules NK et les cellules de gliome contribue à l’élaboration de stratégies visant à améliorer l’élimination des tumeurs par les cellules NK.

La tumeur d'origine fournit des informations sur l'environnement biologique d'origine et les caractéristiques de la tumeur. La compréhension de ces éléments permet d'établir un lien entre les résultats des études menées sur des lignées cellulaires et le comportement réel de la tumeur ainsi que le pronostic du patient.

La microscopie électronique permet une visualisation détaillée des structures cellulaires et subcellulaires dans les lignées cellulaires de gliomes, ce qui est essentiel pour étudier la morphologie cellulaire, l'état des organites et les changements survenant à la suite des traitements.

Le ligand NKG2D est exprimé sur les cellules tumorales et se lie au récepteur NKG2D présent sur les cellules NK, déclenchant ainsi une réponse cytotoxique. L’étude de cette interaction permet de mieux comprendre et, éventuellement, de renforcer les réponses immunitaires contre le gliome.

Les modèles de culture cellulaire en 3D reproduisent plus fidèlement le microenvironnement tumoral, ce qui permet de mieux comprendre la croissance, la migration et la résistance aux médicaments des gliomes. Cette technique est essentielle pour mener des études en oncologie translationnelle plus pertinentes.

Références

  1. Gwon, D.H., et al., « BMAL1 inhibe la prolifération, la migration et l’invasion des cellules U87MG en régulant à la baisse la cycline B1, la phospho-AKT et la métalloprotéinase-9 ». Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
  2. Huang, C., et al., « LITAF augmente la radiosensibilité des cellules de gliome humain par l’intermédiaire de la voie FoxO1 ». Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6) : p. 871-882.
  3. Koc, K., et al., activités antioxydantes et anticancéreuses de l’extrait d’Inula helenium (L.) sur la lignée cellulaire humaine de glioblastome U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3) : p. 658-661.
  4. Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh et A. Ghasempour, « Cytotoxicité et induction de l’apoptose dans des cellules de cancer du sein, de cancer de la peau et de glioblastome par des extraits végétaux ». Mol Biol Rep, 2019. 46(5) : p. 5131-5142.
  5. Fukaya, M., et al., Cytotoxicité des alcaloïdes sesquiterpéniques issus de plantes du genre Nuphar sur des lignées cellulaires sensibles et résistantes aux médicaments. Food Funct, 2018. 9(12) : p. 6279-6286.

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