Células RAG

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USD 395.00*

Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10^⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10^⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).

Los precios no incluyen impuestos ni gastos de envío

cryovial

Número de producto: 305190

Ficha de datos de seguridad

Ficha del producto

Descripción	La línea celular RAG es un mutante no revertible resistente a la 8-azaguanina, derivado de un adenocarcinoma renal de ratones BALB/c. Esta línea se desarrolló mediante pases alternados de animales a cultivos de tejidos para enriquecer la población tumorigénica y, al mismo tiempo, eliminar los fibroblastos estromales normales. Las células RAG presentan una morfología que varía de ameboide a epitelioide, con procesos citoplasmáticos prominentes, y son resistentes a los métodos de selección dependientes de la hipoxantina-guanina fosforibosiltransferasa (HGPRT) debido a su deficiencia enzimática. Esta resistencia ha facilitado su uso en sistemas de selección bioquímica para experimentos de hibridación de células somáticas. Las células RAG se utilizan ampliamente como línea parental en estudios de fusión de células somáticas debido a su compatibilidad con los procedimientos de fusión que emplean el virus Sendai inactivado. Cuando se fusionan con otras líneas celulares, como LM(TK-) o WI-38, los híbridos conservan los cromosomas marcadores y muestran complementación bioquímica de las deficiencias metabólicas. Estos híbridos han sido fundamentales para mapear elementos reguladores genéticos y estudiar la expresión génica, particularmente en enzimas asociadas al riñón como la esterasa ES-2. Los híbridos RAG brindan información sobre la segregación cromosómica tanto interespecífica como intraespecífica, así como sobre la genómica funcional. Además de su papel en los estudios de hibridación, las células RAG han servido como modelo para estudiar la regulación epigenética de la expresión génica. Las células híbridas que involucran a RAG a menudo muestran la extinción y la reexpresión de rasgos genéticos específicos, dependiendo de la retención o la pérdida de cromosomas particulares. Esto convierte a la línea celular RAG en una herramienta valiosa para comprender la dinámica de la regulación genética y la estabilidad cromosómica en células tumorigénicas.
Organismo	Ratón
Tejido	Riñón
Enfermedad	Carcinoma renal de ratón
Sinónimos	Trapo

Raza/Subespecie	BALB/c
Morfología	Ameboide
Propiedades de crecimiento	Adherente

Referencia	RAG (número de catálogo de Cytion 305190)
Nivel de bioseguridad	1
NCBI_TaxID	10090
N.º de acceso de Cellosaurus	CVCL_3575

Expresión de proteínas	Esterasa específica del riñón-2 (ES-2)

Medio de cultivo	EMEM (MEM Eagle), con: 2 mM de L-glutamina, con: 2,2 g/L de NaHCO₃, con: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Suplementos	Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA
Reactivo de disociación	Accutase
Subcultivo	Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos	De 2 a 3 veces por semana
Medio de congelación	Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Descongelación y cultivo de células	Verifique que el vial se mantenga profundamente congelado al momento de la entrega, ya que las células se envían en hielo seco para mantener temperaturas óptimas durante el transporte. Al recibirlo, almacene el criovial inmediatamente a temperaturas inferiores a -150 °C para garantizar la preservación de la integridad celular, o bien continúe con el paso 3 si se requiere un cultivo inmediato. Para el cultivo inmediato, descongele rápidamente el vial sumergiéndolo en un baño de agua a 37 °C con agua limpia y un agente antimicrobiano, agitando suavemente durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño trozo de hielo. Realice todos los pasos posteriores en condiciones estériles bajo una cabina de flujo laminar, desinfectando el criovial con etanol al 70 % antes de abrirlo. Abra con cuidado el vial desinfectado y transfiera la suspensión celular a un tubo de centrífuga de 15 ml que contenga 8 ml de medio de cultivo a temperatura ambiente, mezclando suavemente. Centrifugue la mezcla a 300 x g durante 3 minutos para separar las células y deseche con cuidado el sobrenadante que contenga medio de congelación residual. Resuspende suavemente el sedimento celular en 10 ml de medio de cultivo fresco. Para las células adherentes, divide la suspensión entre dos frascos de cultivo T25; para los cultivos en suspensión, transfiere todo el medio a un solo frasco T25 para promover una interacción y un crecimiento celular efectivos. Siga los protocolos de subcultivo establecidos para el crecimiento y mantenimiento continuos de la línea celular, asegurando resultados experimentales confiables.
Atmósfera de incubación	37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
Condiciones de envío	Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
Condiciones de almacenamiento	Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Esterilidad	Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia. Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Células RAG

Información general

Características

Datos normativos

Datos biomoleculares

Manejo

Control de calidad y análisis molecular