Células NRK-Pom121-EGFP3
USD 800.00*
Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).
Información general
| Descripción | La línea celular NRK-Pom121-EGFP3 se deriva de células renales normales de rata (NRK) y ha sido modificada genéticamente para expresar la proteína de fusión Pom121-EGFP3. Pom121 es una nucleoporina transmembrana que forma parte integral del complejo de poros nucleares (NPC) y desempeña un papel crucial en el ensamblaje de la envoltura nuclear y en la función del NPC. La incorporación de la etiqueta de proteína fluorescente verde mejorada (EGFP3) facilita la visualización y el estudio de la dinámica, la localización y las interacciones de Pom121 dentro de las células vivas mediante microscopía de fluorescencia. Esto convierte a la línea celular NRK-Pom121-EGFP3 en una herramienta valiosa para investigar los mecanismos de transporte nuclear y la arquitectura del NPC. Las células NRK, la línea parental de NRK-Pom121-EGFP3, se utilizan comúnmente en diversas aplicaciones de investigación debido a sus características de crecimiento estable y su morfología epitelial. La modificación para expresar Pom121-EGFP3 brinda a los investigadores un modelo sólido para examinar los mecanismos moleculares que subyacen al transporte nucleocitoplasmático, la organización estructural del NPC y su regulación durante la división y diferenciación celular. Además, esta línea celular puede utilizarse para estudiar los efectos de diversas perturbaciones genéticas y farmacológicas sobre la función del NPC, lo que ofrece información sobre enfermedades asociadas a defectos en el transporte nuclear, como el cáncer y los trastornos neurodegenerativos. En general, la línea celular NRK-Pom121-EGFP3 representa una herramienta sofisticada en biología celular e investigación molecular, que brinda información de alta resolución sobre los procesos dinámicos que rigen las interacciones nucleocitoplasmáticas. Su capacidad para permitir la observación en tiempo real de los componentes del NPC en un contexto celular vivo la convierte en una herramienta invaluable para avanzar en nuestra comprensión de los mecanismos de transporte celular y sus implicaciones en la salud y la enfermedad. |
|---|---|
| Organismo | Rata |
| Tejido | Riñón |
| Sinónimos | NRK Pom121-EGFP3, NRK Pom121-3EGFP, NRK-Pom121-3EGFP |
Características
| Raza/Subespecie | OsborneMendel |
|---|---|
| Morfología | Células similares a los fibroblastos con forma fusiforme |
| Propiedades de crecimiento | Monocapa, adherente |
Datos normativos
| Referencia | NRK-Pom121-EGFP3 (número de catálogo de Cytion 500669) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 10116 |
| N.º de acceso de Cellosaurus | CVCL_AV96 |
| Depositante | El Laboratorio Ellenberg (EMBL) |
Datos biomoleculares
| Receptores expresados | Factor de crecimiento epidérmico (EGF), actividad estimulante de la multiplicación (MSA) |
|---|---|
| Expresión de proteínas | Pom121-EGFP3: Ubicación/Gen: 1..589 / Pcmv, 653..4250 / Pom121, 4251..4287 / nulo, 4318..6546 / 3EGFP, 7780..8574 / KanR/NeoR |
| Productos | Factor de crecimiento epidérmico (EGF), actividad estimulante de la multiplicación (MSA), POM121, transmembrana, nucleoporina, promotor del CMV, neomicina, fosfotransferasa |
Manejo
| Medio de cultivo | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Añade al medio un 10 % de FBS y 0,5 mg/mL de G418 |
| Reactivo de disociación | Accutase |
| Subcultivo | Deshazte del medio usado y lava las células con PBS. Agrega una solución recién preparada de 0,025 % de tripsina y 0,02 % de EDTA calentada a 37 grados Celsius y espera hasta que las células se desprendan, lo que suele tardar unos 5 minutos. Neutraliza la tripsina agregando medio fresco, luego transfiere la mezcla celular a un tubo y centrifuga. Después de la centrifugación, retira el sobrenadante, resuspende el sedimento celular en medio de cultivo fresco y transfiere la suspensión a nuevos frascos. Incorpora G418 al medio de cultivo para alcanzar una concentración final de 0,5 mg/ml. |
| Densidad de siembra | De 2 a 4 × 10⁴ células/cm² |
| Renovación de fluidos | De 2 a 3 veces por semana |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación. |
| Descongelación y cultivo de células |
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| Atmósfera de incubación | 37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido. |
Control de calidad y análisis molecular
| Esterilidad | Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia. Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias. |
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