Células NCH612

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USD 800.00*

Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10^⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10^⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).

Los precios no incluyen impuestos ni gastos de envío

cryovial

Número de producto: 300121

Ficha de datos de seguridad

Ficha del producto

Descripción	NCH612 es una línea celular oligodendrocítica derivada de un paciente, que proviene de tejido cerebral humano y sirve como modelo de investigación relevante para el oligodendroglioma anaplásico (grado III de la OMS). Esta línea celular presenta la mutación IDH1 R132H, una alteración genética característica que se asocia con frecuencia a los oligodendrogliomas. La mutación da lugar a modificaciones epigenéticas, entre ellas el fenotipo metilador de islas CpG en gliomas (G-CIMP), que contribuye al desarrollo y la progresión del tumor. Cabe destacar que la NCH612 presenta una deleción parcial de los brazos cromosómicos 1p y 19q, una característica genética que se encuentra comúnmente en los oligodendrogliomas y que se asocia con un mejor pronóstico y una mejor respuesta a ciertas terapias. Los estudios han demostrado que el NCH612 es particularmente sensible a la decitabina (DAC), un inhibidor de la metiltransferasa de ADN. El tratamiento con DAC da como resultado una reducción de la proliferación celular y la formación de colonias, principalmente a través de la regulación a la baja de TERT (transcriptasa inversa de la telomerasa) y la regulación al alza de p21, un inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina involucrado en la respuesta al daño en el ADN. Curiosamente, esta sensibilidad parece estar relacionada con la presencia tanto de la mutación en IDH1 como de la codeleción 1p/19q, ya que otras líneas celulares de glioma con mutación en IDH1 que carecen de esta deleción, como la NCH1681, muestran resistencia a la DAC. Estos hallazgos sugieren que las terapias epigenéticas como el DAC podrían ser particularmente efectivas en los oligodendrogliomas anaplásicos con mutación en IDH1 y codeleción 1p/19q. Investigaciones moleculares adicionales revelan que el tratamiento con DAC en las células NCH612 conduce al enriquecimiento de vías relacionadas con la replicación del ADN, la regulación del ciclo celular y la función lisosómica, lo que arroja luz sobre el mecanismo de acción del fármaco. La represión de TERT por el DAC está mediada por p21, lo que resalta el papel fundamental de esta vía en la respuesta a la terapia epigenética. Dado su perfil genético y epigenético bien definido, la línea celular NCH612 representa un valioso modelo in vitro para estudiar la biología de los oligodendrogliomas anaplásicos y para desarrollar terapias dirigidas a tumores con mutación en IDH1 y codeleción 1p/19q.
Organismo	Humano
Tejido	Cerebro
Enfermedad	Oligodendroglioma anaplásico, grado III según la OMS, con mutación en el gen IDH1 (R132H)

Edad	39 años
Género	Hombre
Origen étnico	caucásico
Propiedades de crecimiento	Cultivo de esferoides

Referencia	NCH612 (número de catálogo de Cytion 300121)
Nivel de bioseguridad	1
NCBI_TaxID	9606
N.º de acceso de Cellosaurus	CVCL_x913

Medio de cultivo	DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
Suplementos	Añade al medio 5 mg/L de heparina, 20 ng/mL de bFGF, 20 microgramos/L de EGF, 5 mg/L de insulina, 100 mg/L de transferrina, 5,2 microgramos/L de selenito de sodio, 6,3 microgramos/L de progesterona, 161,1 microgramos/L de putrescina y 50 mg/L de hidrocortisona
Subcultivo	Para realizar subcultivos de esferoides, comience por disociar mecánicamente los esferoides pipeteando de arriba hacia abajo de 5 a 10 veces con una pipeta Eppendorf con puntas filtrantes de 1000 μl. Después, centrifuga la mezcla a 300 g durante 5 minutos a temperatura ambiente para sedimentar las células. Desecha el sobrenadante y resuspende el sedimento celular en medio de cultivo fresco. Finalmente, transfiera las células resuspendidas a nuevos recipientes de cultivo para promover una mayor formación de esferoides. Este método garantiza una disociación eficiente de los esferoides y los prepara para un crecimiento continuo en un nuevo entorno.
Densidad de siembra	1 x 10⁵ células/mL
Renovación de fluidos	Se debe agregar medio fresco cada 2 a 3 días (de 2 a 5 ml, dependiendo del tamaño del frasco de cultivo celular).
Recuperación tras el deshielo	Con calma. Después de descongelar, deja que las células se recuperen del proceso de congelación durante al menos 48 horas.
Medio de congelación	Como medio de criopreservación, utilizamos un 50 % de medio basal + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Descongelación y cultivo de células	Verifique que el vial se mantenga profundamente congelado al momento de la entrega, ya que las células se envían en hielo seco para mantener temperaturas óptimas durante el transporte. Al recibirlo, almacene el criovial inmediatamente a temperaturas inferiores a -150 °C para garantizar la preservación de la integridad celular, o bien continúe con el paso 3 si se requiere un cultivo inmediato. Para el cultivo inmediato, descongele rápidamente el vial sumergiéndolo en un baño de agua a 37 °C con agua limpia y un agente antimicrobiano, agitando suavemente durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño trozo de hielo. Realice todos los pasos posteriores en condiciones estériles bajo una cabina de flujo laminar, desinfectando el criovial con etanol al 70 % antes de abrirlo. Abra con cuidado el vial desinfectado y transfiera la suspensión celular a un tubo de centrífuga de 15 ml que contenga 8 ml de medio de cultivo a temperatura ambiente, mezclando suavemente. Centrifugue la mezcla a 300 x g durante 3 minutos para separar las células y deseche con cuidado el sobrenadante que contenga medio de congelación residual. Resuspende suavemente el sedimento celular en 10 ml de medio de cultivo fresco. Para las células adherentes, divide la suspensión entre dos frascos de cultivo T25; para los cultivos en suspensión, transfiere todo el medio a un solo frasco T25 para promover una interacción y un crecimiento celular efectivos. Siga los protocolos de subcultivo establecidos para el crecimiento y mantenimiento continuos de la línea celular, asegurando resultados experimentales confiables.
Atmósfera de incubación	37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
Condiciones de envío	Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
Condiciones de almacenamiento	Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Esterilidad	Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia. Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Células NCH612

Información general

Características

Datos normativos

Datos biomoleculares

Manejo

Control de calidad y análisis molecular