Células KC
Información general
| Descripción | KC (Kc167) es una línea celular embrionaria de Drosophila melanogaster derivada de un embrión hembra en la etapa de cierre dorsal, registrada en Cellosaurus como CVCL_Z833. La línea fue establecida originalmente y se ha utilizado ampliamente en biología celular de Drosophila, cribados genéticos y genómica funcional. Las células Kc167 han sido inmortalizadas con SV40 y crecen de manera semiadherente, formando una población mixta de células adheridas y otras que flotan libremente. Se encuentran entre las líneas celulares de Drosophila mejor caracterizadas y son totalmente aptas para el silenciamiento génico mediado por ARNi, lo que las convierte en un modelo fundamental para los cribados de ARNi a nivel genómico en la biología de los invertebrados. Las células KC son aplicables en la biología celular de Drosophila, cribados de ARNi y CRISPR a nivel genómico, estudios de vías de transducción de señales (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), investigación sobre la inmunidad innata y estudios comparativos de vías conservadas evolutivamente. El genoma de Drosophila, completamente secuenciado y anotado, combinado con amplias bases de datos públicas de reactivos de ARNi (p. ej., DRSC/TRiP), hace que las células KC sean particularmente poderosas para el descubrimiento genómico funcional sin sesgos. Se aplica la clasificación BSL-2 debido a la inmortalización con SV40. Las células KC se cultivan en medio Schneider para Drosophila suplementado con 2 mM de glutamina y 10 % de suero fetal bovino (FBS). Es fundamental destacar que las líneas celulares de Drosophila se cultivan a 25 °C en aire ambiente sin CO₂ (no a 37 °C / 5 % de CO₂, como en el caso de las células de mamíferos). Las células se pasan mediante una resuspensión y dilución suaves (crecimiento semiadherente). El medio se renueva o las células se diluyen cada 2–3 días. |
|---|---|
| Organismo | Drosophila melanogaster (mosca de la fruta) |
| Tejido | Embrión |
| Enfermedad | Normal |
| Lugar de metástasis | Embrión (etapa de cierre dorsal) |
| Aplicaciones | Biología celular de Drosophila; cribados de ARNi a nivel genómico; cribados CRISPR; transducción de señales (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); inmunidad innata; genómica funcional de invertebrados |
| Sinónimos | KC, K C |
Características
| Edad | Etapa de cierre dorsal |
|---|---|
| Género | Mujer |
| Morfología | De tipo epitelial semiadherente |
| Tipo de célula | Células embrionarias |
| Propiedades de crecimiento | semiadherente |
Datos normativos
| Referencia | KC (número de catálogo de Cytion 300604) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| N.º de acceso de Cellosaurus | CVCL_Z833 |
| Estado de los OGM | GMO-S2: Esta línea celular de Drosophila contiene un casete de inmortalización SV40 integrado de manera estable. Se requiere un nivel de contención BSL-2. Esta clasificación se aplica únicamente en Alemania y puede variar en otros lugares. |
Datos biomoleculares
| Susceptibilidad a los virus | SV40 inmortalizado |
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Manejo
| Medio de cultivo | Medio de Schneider para Drosophila + 2 mM de glutamina + 10 % de suero fetal bovino (FBS). |
|---|---|
| Suplementos | Añade al medio 2 mM de glutamina y un 10 % de FBS |
| Reactivo de disociación | No es necesario (se adhiere parcialmente; resuspender con cuidado) |
| Tiempo de duplicación | aprox. de 24 a 48 horas |
| Subcultivo | Con una pipeta, agita suavemente el cultivo para resuspender las células semiadherentes. Transfiera un volumen adecuado a un nuevo frasco y agregue medio de Schneider fresco y precalentado. Diluya hasta alcanzar una densidad de 5 × 10⁵ a 1 × 10⁶ células/ml. Incube a 25 °C en aire ambiente sin CO₂. |
| Relación de división | 1 a 3 |
| Densidad de siembra | De 5 × 10⁵ a 1 × 10⁶ células/ml |
| Renovación de fluidos | Cada 2 o 3 días |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación. |
| Descongelación y cultivo de células |
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| Atmósfera de incubación | 25 °C, aire ambiente (no se requiere CO₂). |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido. |