Células K7M2 wt-Luc
Información general
| Descripción | K7M2 wt-Luc es un derivado bioluminiscente de la línea celular murina de osteosarcoma K7M2, modificada genéticamente para expresar de manera estable un gen reportero de luciferasa de luciérnaga. La línea celular parental K7M2 se estableció a partir del ascitis de un osteosarcoma espontáneo en un ratón BALB/c y se caracteriza por su morfología osteoblástica y su alto potencial metastásico, particularmente hacia los pulmones. K7M2 es uno de los pocos modelos singénicos de osteosarcoma disponibles en el fondo genético BALB/c, lo que lo convierte en una herramienta valiosa para estudiar la biología del osteosarcoma, las interacciones entre el tumor y el sistema inmunológico, y la evaluación de estrategias de inmunoterapia en un huésped inmunocompetente. La integración estable de luciferasa en K7M2 wt-Luc permite la obtención de imágenes por bioluminiscencia (BLI) sensibles y no invasivas del crecimiento del tumor primario y la diseminación metastásica pulmonar en ratones BALB/c singénicos. Tras la administración del sustrato luciferina, la señal emitida se correlaciona con el número de células tumorales viables, lo que permite el monitoreo longitudinal del injerto tumoral, la colonización metastásica y la respuesta terapéutica sin necesidad de procedimientos invasivos en cada punto temporal. Esto hace que K7M2 wt-Luc sea particularmente adecuado para estudios preclínicos que evalúen agentes antitumorales y antimetastásicos, inhibidores de puntos de control y estrategias de tratamiento combinado en el osteosarcoma. K7M2 wt-Luc conserva las propiedades biológicas e inmunológicas de la línea parental K7M2, incluida la expresión del componente C3 del complemento y del receptor Fc gamma I (FcgRI), características que pueden influir en las interacciones con el sistema inmunitario innato. El reportero de luciferasa mejora sustancialmente la flexibilidad experimental y la sensibilidad para el seguimiento en tiempo real de la progresión tumoral. Los investigadores deben validar la actividad de la luciferasa, la cinética de crecimiento y el comportamiento metastásico en sus condiciones experimentales específicas antes de su uso in vivo a gran escala. |
|---|---|
| Organismo | Ratón |
| Tejido | Ascitis |
| Enfermedad | Osteosarcoma en ratones |
| Lugar de metástasis | Pulmón |
| Aplicaciones | Investigación sobre el osteosarcoma; modelo tumoral singénico BALB/c; imágenes de metástasis pulmonares mediante bioluminiscencia; evaluación de fármacos antitumorales y antimetastásicos; ensayos con inhibidores de puntos de control; estudios de interacción con el sistema inmunitario innato (C3, FcgRI); inmunoterapia para el cáncer óseo pediátrico |
| Sinónimos | K7M2-WT, K7M2 |
Características
| Raza/Subespecie | BALB/c |
|---|---|
| Edad | 895 días |
| Género | Mujer |
| Tipo de célula | Osteoblasto |
| Propiedades de crecimiento | Adherente |
Datos normativos
| Referencia | K7M2 wt-Luc (número de catálogo de Cytion 305684) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| N.º de acceso de Cellosaurus | Sin asignar (derivado del reportero K7M2 wt-Luc; osteosarcoma BALB/c singénico K7M2 parental) |
| Estado de los OGM | GMO-S1: Esta línea celular contiene un casete reportero de luciferasa de luciérnaga (Luc2, optimizado por codones) integrado de manera estable, introducido mediante transducción con lentivirus incompetente para la replicación. La población celular policlonal resultante se mantuvo bajo selección con puromicina (1–5 µg/mL). Se requiere contención de nivel S1. Esta clasificación se aplica únicamente en Alemania y puede variar en otros lugares. |
Datos biomoleculares
| Receptores expresados | Complemento (C3), expresado; receptor Fc, IgG, de alta afinidad I (Fcgr1), expresado |
|---|---|
| Expresión de antígenos | Luc2 (luciérnaga, optimizado por codones) |
| Tumorigénico | Sí |
Manejo
| Medio de cultivo | DMEM |
|---|---|
| Suplementos | Añade al medio un 10 % de FBS |
| Reactivo de disociación | Accutase |
| Subcultivo | Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco. |
| Relación de división | 1 a 3 |
| Densidad de siembra | De 1 a 3 × 10⁴ células/cm² |
| Renovación de fluidos | De 2 a 3 veces por semana |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación. |
| Descongelación y cultivo de células |
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| Atmósfera de incubación | 37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido. |
Control de calidad y análisis molecular
| Lugar de metástasis: | Pulmón |
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