Células HeLa EB3 GFP KIRC14
Información general
| Descripción | HeLa EB3-GFP Kirc 14 es un derivado genéticamente modificado de la línea celular humana HeLa de carcinoma cervical, diseñado para expresar de manera estable un constructo de fusión de EB3 (proteína de unión a extremos 3) marcado con GFP, con «Kirc 14» denota un subclon específico (clon 14) seleccionado del grupo de células transfectadas. La EB3 es un miembro de la familia de proteínas de unión a extremos que sigue los extremos positivos de los microtúbulos en crecimiento y sirve como marcador del comportamiento dinámico de los microtúbulos en células vivas. La proteína de fusión GFP-EB3 produce señales fluorescentes características con forma de cometa en las puntas de los microtúbulos en proceso de polimerización, lo que permite la obtención de imágenes en células vivas de la dinámica de los microtúbulos, el transporte intracelular y la organización del citoesqueleto en tiempo real. HeLa EB3-GFP Kirc 14 se utiliza en la investigación en biología celular para la obtención de imágenes de células vivas de la dinámica del extremo positivo de los microtúbulos, estudios del ensamblaje del huso mitótico y las interacciones entre el cinetocoro y los microtúbulos, investigaciones sobre el transporte de carga intracelular y la evaluación de compuestos que afectan la dinámica de la polimerización de los microtúbulos. La expresión subclonal estable de GFP-EB3 proporciona una intensidad y un patrón de fluorescencia consistentes a lo largo de los pases, lo que hace que el clon 14 sea adecuado para ensayos de imágenes cuantitativas y el cribado de alto rendimiento de agentes dirigidos a los microtúbulos. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tejido | Cuello uterino |
| Enfermedad | Adenocarcinoma cervical (linaje HeLa); transfectado de manera estable con GFP-EB3 (reportero del extremo positivo de los microtúbulos) |
| Aplicaciones | Imágenes de la dinámica de los microtúbulos en células vivas; estudios del huso mitótico; investigación sobre la interacción entre los cinetocoros y los microtúbulos; transporte intracelular; cribado de fármacos dirigidos a los microtúbulos |
Características
| Morfología | De tipo epitelial |
|---|---|
| Tipo de célula | Células epiteliales |
| Propiedades de crecimiento | Adherente |
Datos normativos
| Referencia | HeLa EB3-GFP Kirc 14 27/09/24 (número de catálogo de Cytion 305718) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| N.º de acceso de Cellosaurus | Derivado de HeLa (CVCL_0030); subclon de GFP-EB3 sin asignación independiente |
| Estado de los OGM | GMO-S1: Esta línea HeLa EB3 GFP KIRC14 contiene un constructo EB3 marcado con GFP para el seguimiento del extremo positivo de los microtúbulos en imágenes de células vivas. Esta clasificación se aplica únicamente en Alemania y puede variar en otros países. |
Datos biomoleculares
Manejo
| Medio de cultivo | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Añade al medio un 10 % de FBS |
| Reactivo de disociación | Accutase, 10 min., 37 °C |
| Tiempo de duplicación | aprox. 24 horas |
| Subcultivo | Retira el medio usado de las células adherentes y lávalas con PBS. Cúbrelas con Accutase, incúbalas a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos, resuspendelas en medio, centrifúgalas a 300×g durante 3 minutos y transfiérelas a frascos nuevos con medio de selección. |
| Relación de división | Del 1 al 5 |
| Densidad de siembra | De 1 a 3 × 10⁴ células/cm² |
| Renovación de fluidos | De 2 a 3 veces por semana |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación. |
| Descongelación y cultivo de células |
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| Atmósfera de incubación | 37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido. |
Control de calidad y análisis molecular
Certificado de análisis (CoA)
| Número de lote | Tipo de certificado | Fecha | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305718-260526 | Certificado de análisis | 13. Jul. 2026 | 305718 |