Células HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

USD 800.00*

Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10^⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10^⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).

Los precios no incluyen impuestos ni gastos de envío

cryovial

Número de producto: 301568

Ficha de datos de seguridad

Ficha del producto

Descripción	La línea celular HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP es un modelo derivado de células humanas diseñado para aplicaciones avanzadas de edición genética y fluorescencia. Esta línea celular se basa en una línea celular humana parental y ha sido modificada mediante la tecnología CRISPR-Cas9 para expresar el gen CAP-H (proteína H asociada a los cromosomas) marcado con la proteína fluorescente verde mejorada monomérica (mEGFP). Esta modificación permite la visualización y el seguimiento precisos de la CAP-H, un componente del complejo condensina que es crucial para la condensación y estabilización cromosómica durante la división celular. El marcador mEGFP proporciona una señal de fluorescencia intensa y estable, lo que hace que esta línea celular sea ideal para la obtención de imágenes de células vivas y ensayos basados en fluorescencia. La línea celular HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP es particularmente valiosa para estudios sobre la regulación del ciclo celular, la mitosis y la dinámica cromosómica. Los investigadores pueden utilizar este modelo para investigar el papel de los complejos de condensina en el mantenimiento de la integridad cromosómica, especialmente durante fases críticas como la metafase y la anafase. La integración estable de la etiqueta mEGFP garantiza una expresión constante y resultados experimentales confiables, lo que mejora la reproducibilidad entre diferentes estudios.
Organismo	Humano
Tejido	Endocérvix
Enfermedad	Adenocarcinoma
Lugar de metástasis	Localización del tumor primario (endocérvix)
Aplicaciones	Biología del complejo condensina I; imágenes de CAP-H; condensación cromosómica; arquitectura de las cromátidas mitóticas; imágenes de células vivas; investigación del ciclo celular; validación de knock-in con CRISPR; estudios de integridad cromosómica
Sinónimos	HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP n.º 86, HK CRISPR CAP-H-mEGFP

Edad	30 años
Género	Mujer
Origen étnico	Afroamericano
Morfología	Células de tipo epitelial con forma de piedra en mosaico
Tipo de célula	Células epiteliales
Propiedades de crecimiento	Adherente

Referencia	HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP (número de catálogo de Cytion 301568)
Nivel de bioseguridad	1
NCBI_TaxID	9606
N.º de acceso de Cellosaurus	CVCL_UR43
Depositante	El Laboratorio Ellenberg (EMBL)
Estado de los OGM	GMO-S1: Esta línea HeLa Kyoto contiene un knock-in de mEGFP mediado por CRISPR en el locus CAP-H, lo que permite la visualización en vivo de la cromatina mitótica. Esta clasificación se aplica únicamente en Alemania y puede variar en otros países.

Productos	EGFP (proteína fluorescente verde mejorada)

Medio de cultivo	DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Suplementos	Añade al medio un 10 % de FBS
Reactivo de disociación	Accutase
Subcultivo	Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos	De 2 a 3 veces por semana
Medio de congelación	Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Descongelación y cultivo de células	Verifique que el vial se mantenga profundamente congelado al momento de la entrega, ya que las células se envían en hielo seco para mantener temperaturas óptimas durante el transporte. Al recibirlo, almacene el criovial inmediatamente a temperaturas inferiores a -150 °C para garantizar la preservación de la integridad celular, o bien continúe con el paso 3 si se requiere un cultivo inmediato. Para el cultivo inmediato, descongele rápidamente el vial sumergiéndolo en un baño de agua a 37 °C con agua limpia y un agente antimicrobiano, agitando suavemente durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño trozo de hielo. Realice todos los pasos posteriores en condiciones estériles bajo una cabina de flujo laminar, desinfectando el criovial con etanol al 70 % antes de abrirlo. Abra con cuidado el vial desinfectado y transfiera la suspensión celular a un tubo de centrífuga de 15 ml que contenga 8 ml de medio de cultivo a temperatura ambiente, mezclando suavemente. Centrifugue la mezcla a 300 x g durante 3 minutos para separar las células y deseche con cuidado el sobrenadante que contenga medio de congelación residual. Resuspende suavemente el sedimento celular en 10 ml de medio de cultivo fresco. Para las células adherentes, divide la suspensión entre dos frascos de cultivo T25; para los cultivos en suspensión, transfiere todo el medio a un solo frasco T25 para promover una interacción y un crecimiento celular efectivos. Siga los protocolos de subcultivo establecidos para el crecimiento y mantenimiento continuos de la línea celular, asegurando resultados experimentales confiables.
Atmósfera de incubación	37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
Condiciones de envío	Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
Condiciones de almacenamiento	Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Esterilidad	Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia. Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Células HK-CRISPR-CAP-H-mEGFP

Información general

Características

Datos normativos

Datos biomoleculares

Manejo

Control de calidad y análisis molecular