Células HEK293-Rpn11-HTBH
USD 800.00*
Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).
Información general
| Descripción | Las células HEK293 estables-Rpn11-HTBH son un derivado transfectado de manera estable de la línea celular HEK293 (riñón embrionario humano 293), diseñada para expresar una versión marcada de Rpn11 (también conocida como PSMD14 o POH1), la subunidad deubiquitinasa del complejo de la tapa del proteasoma 26S. Rpn11 es una desubiquitinasa dependiente de Zn²⁺ con dominio JAMM que elimina las cadenas de ubiquitina de los sustratos unidos al proteasoma durante la degradación proteasómica. La etiqueta HTBH (hexahistidina-TEV-péptido aceptor de biotina-hexahistidina) permite la purificación por afinidad de complejos que contienen Rpn11 en condiciones nativas, lo que hace que esta línea sea particularmente adecuada para la purificación de complejos del proteasoma y estudios de interactoma. Esta línea celular es aplicable en estudios de la biología del proteasoma 26S, la regulación de la vía ubiquitina-proteasoma (UPS), la función de Rpn11/PSMD14 en el control de calidad de las proteínas, el ensamblaje y la dinámica del proteasoma, y el mecanismo de acción de los inhibidores del proteasoma. También se utiliza para la purificación por afinidad de complejos proteasómicos nativos y como modelo para estudiar la biología de las desubiquitinases en el contexto del proteasoma. El sistema de etiquetado HTBH permite una purificación altamente rigurosa de complejos biotinilados mediante pulldowns basados en estreptavidina. Las células HEK293 estables (Rpn11-HTBH) se mantienen como un cultivo adherente en DMEM suplementado con un 10 % de FBS y el antibiótico de selección adecuado para mantener la expresión del transgén a 37 °C en una atmósfera humidificada con un 5 % de CO₂. Las células se subcultivan con Accutase cuando alcanzan una confluencia del 80–90 % (proporción de división de 1:5 a 1:10). El medio se renueva cada 2–3 días. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tejido | Riñón |
| Enfermedad | Riñón fetal transformado/inmortalizado (linaje HEK293; transgén Rpn11-HTBH) |
| Aplicaciones | Biología del proteasoma 26S; función de Rpn11/PSMD14; vía de la ubiquitina-proteasoma; purificación del complejo proteasoma; biología de las desubiquitinases; purificación por afinidad con la etiqueta HTBH; estudios del interactoma del proteasoma |
Características
| Morfología | De tipo epitelial |
|---|---|
| Tipo de célula | Células epiteliales |
| Propiedades de crecimiento | Adherente |
Datos normativos
| Referencia | Células HEK293 estables - Rpn11-HTBH (número de catálogo de Cytion 305719) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Estado de los OGM | GMO-S1: Este derivado de HEK293 contiene un casete de expresión de Rpn11-HTBH integrado de manera estable (Rpn11/PSMD14 marcado con hexahistidina-TEV-péptido aceptor de biotina-hexahistidina). Esta clasificación se aplica únicamente en Alemania y puede variar en otros países. |
Datos biomoleculares
Manejo
| Medio de cultivo | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Añade al medio un 10 % de FBS |
| Reactivo de disociación | La mayoría de las células se desprenden en PBS; si es necesario, agrega Accutase durante 5 minutos a temperatura ambiente |
| Tiempo de duplicación | aprox. de 24 a 36 horas |
| Subcultivo | Retirar el medio, lavar con PBS sin calcio ni magnesio, cubrir con Accutase, incubar de 8 a 10 minutos a temperatura ambiente, resuspender en medio, centrifugar a 300×g durante 3 minutos, desechar el sobrenadante y volver a sembrar en medio fresco. |
| Relación de división | Del 1 al 10 |
| Densidad de siembra | De 2 a 4 × 10⁴ células/cm² |
| Renovación de fluidos | Cada 2 o 3 días |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación. |
| Descongelación y cultivo de células |
|
| Atmósfera de incubación | 37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido. |
Control de calidad y análisis molecular
Certificado de análisis (CoA)
| Número de lote | Tipo de certificado | Fecha | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305719-040526 | Certificado de análisis | 24. Jun. 2026 | 305719 |