Células DAKIKI

DAKIKI es una línea celular linfoblastoide B humana positiva para el virus de Epstein-Barr (VEB) que expresa IgA1 de superficie y secreta IgA1 polimérica. Se derivó originalmente de linfocitos periféricos de un paciente adulto con carcinoma nasofaríngeo y, posteriormente, se estableció como un cultivo en suspensión de proliferación continua. Las células presentan una morfología linfoblastoide típica y crecen en medios a base de RPMI suplementados con suero. DAKIKI se ha utilizado ampliamente como modelo de células B humanas productoras de IgA1, particularmente para estudios que investigan la síntesis de inmunoglobulinas, la regulación de la secreción y la glicosilación postraduccional.

Los análisis bioquímicos y basados en lectinas han demostrado que la IgA1 secretada por las células DAKIKI presenta glicanos O-ligados con deficiencia de galactosa en la región de bisagra. El análisis de la composición de monosacáridos y el ELISA con lectinas confirman el enriquecimiento de residuos terminales o de N-acetilgalactosamina (GalNAc) α2,6-sialilada, una glicoforma característica de la IgA1 con glicosilación anómala observada en la nefropatía por IgA. El tratamiento con neuraminidasa aumenta notablemente la reactividad de la aglutinina de Helix aspersa, lo que indica la presencia de estructuras de GalNAc sialiladas. Los ensayos funcionales con fracciones enriquecidas en el aparato de Golgi de células DAKIKI demuestran la actividad de la α2,6-sialiltransferasa CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1, lo que confirma la capacidad de estas células para sialilar directamente O-glicanos deficientes en Gal. Los análisis transcripcionales revelan la expresión de ST6-GalNAcII, pero no de ST6-GalNAcI, lo que respalda el papel de ST6-GalNAcII en la mediación de la sialilación α2,6 del GalNAc de la región bisagra en la IgA1.

Además de su utilidad en la investigación sobre la glicosilación, se ha evaluado a DAKIKI en cuanto a su respuesta a factores inductores de células B y a los ésteres de forbol, que pueden modular la secreción de inmunoglobulinas en ciertas líneas celulares B humanas. Si bien DAKIKI secreta IgA de manera constitutiva, se ha incluido entre los modelos de células B transformadas por el VEB que se utilizan para estudiar la regulación de la producción de inmunoglobulinas y los estados de diferenciación. Gracias a su perfil estable de secreción de IgA1 y a la producción reproducible de glicanos de la región de bisagra α2,6-sialilados y deficientes en galactosa, DAKIKI representa un sistema in vitro bien caracterizado para investigar los mecanismos de glicosilación de la IgA1, la diferenciación de las células B y la patogénesis molecular de los trastornos asociados a la IgA.