Celdas RF/6A
USD 550.00*
Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).
Información general
| Descripción | RF/6A es una línea celular de endotelio coroideo retiniano de macaco rhesus (Macaca mulatta) establecida a partir de tejido fetal de la coroides y la retina. La línea está registrada en Cellosaurus con el número CVCL_4552 y crece como una monocapa adherente con morfología de tipo epitelial. Las células RF/6A conservan características endoteliales clave, entre ellas la expresión del factor VIII (factor von Willebrand), la fibronectina y los gránulos de Weibel-Palade, detectables mediante microscopía electrónica; estos últimos confirman su identidad endotelial. La línea se estableció originalmente para estudios de la vascularización retiniana y coroidea, y se ha adoptado ampliamente como modelo endotelial de primates para la investigación de la angiogénesis ocular. La línea RF/6A es aplicable en la investigación de la angiogénesis ocular, los estudios de la vascularización retiniana y coroidea, la evaluación de agentes antiangiogénicos (inhibidores del VEGF, bevacizumab, ranibizumab), la modelización de la degeneración macular relacionada con la edad (DMAE), la biología de la retinopatía diabética y la evaluación de la permeabilidad vascular en el microambiente ocular. Su origen en primates no humanos (NHP) hace que la línea RF/6A sea más cercana a la biología vascular de la retina humana que los modelos endoteliales de roedores, particularmente para estudios que involucran respuestas a isoformas del VEGF específicas de primates y farmacología ocular. La línea se utiliza comúnmente en ensayos de formación de tubos, ensayos de migración y experimentos de estimulación con VEGF. La línea RF/6A se mantiene como un cultivo adherente en medio EMEM suplementado con un 10 % de suero fetal bovino (FBS) y un 1 % de aminoácidos no esenciales (NEAA) a 37 °C en una atmósfera humidificada con un 5 % de CO₂. Las células se subcultivan con Accutase cuando alcanzan una confluencia del 70–80 % para prevenir la inhibición por contacto y la pérdida del fenotipo endotelial. La proporción de división es de 1:3 a 1:5, y la densidad de siembra es de 1–2 × 10⁴ células/cm². El medio se renueva 2–3 veces por semana. |
|---|---|
| Organismo | Macaco rhesus |
| Tejido | Coroides, retina |
| Enfermedad | Endotelio coroideo retiniano normal (fetal; no tumorigénico) |
| Lugar de metástasis | No aplicable (línea celular endotelial coroidea retiniana fetal normal) |
| Aplicaciones | Investigación sobre la angiogénesis ocular; vascularización retiniana y coroidea; evaluación de la terapia anti-VEGF (bevacizumab, ranibizumab); modelización de la DMAE y la retinopatía diabética; ensayos de formación de tubos; permeabilidad vascular; modelo endotelial retiniano en primates NHP |
Características
| Edad | Feto |
|---|---|
| Género | Sexo no especificado |
| Origen étnico | No aplicable (línea celular de primates no humanos; Macaca mulatta) |
| Morfología | De tipo epitelial |
| Tipo de célula | Células endoteliales |
| Propiedades de crecimiento | Adherente |
Datos normativos
| Referencia | RF/6A (número de catálogo de Cytion 305150) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 9544 |
| N.º de acceso de Cellosaurus | CVCL_4552 |
| Estado de los OGM | Sin modificación genética; línea celular de endotelio coroideo retiniano fetal de macaco rhesus de tipo silvestre |
Datos biomoleculares
| Expresión de proteínas | Factor VIII, fibronectina |
|---|
Manejo
| Medio de cultivo | EMEM (MEM Eagle), con: 2 mM de L-glutamina, con: 2,2 g/L de NaHCO₃, con: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a) |
|---|---|
| Suplementos | Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA |
| Reactivo de disociación | Accutase |
| Tiempo de duplicación | aprox. de 24 a 36 horas |
| Subcultivo | Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco. |
| Relación de división | Del 1 al 5 |
| Densidad de siembra | De 1 a 2 × 10⁴ células/cm² |
| Renovación de fluidos | De 2 a 3 veces por semana |
| Recuperación tras el deshielo | Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24 horas antes del primer cambio de medio. No permita que los cultivos alcancen la confluencia total, ya que la inhibición por contacto podría reducir el fenotipo endotelial. |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación. |
| Descongelación y cultivo de células |
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| Atmósfera de incubación | 37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido. |
Control de calidad y análisis molecular
| Esterilidad | Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia. Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias. |
|---|
Certificado de análisis (CoA)
| Número de lote | Tipo de certificado | Fecha | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 305150-160223 | Certificado de análisis | 23. May. 2025 | 305150 |
| 305150-160223SF | Certificado de análisis | 23. May. 2025 | 305150 |
| 305150-180625 | Certificado de análisis | 18. Aug. 2025 | 305150 |
| 305150-260723 | Certificado de análisis | 22. Jan. 2026 | 305150 |